Препараты серебра в лечении воспалительных заболеваний носа Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»



медицинским совет 2015 | № 15

М.Л. ДЕРБЕНЕВА 1 к.м.н., А.Л. ГУСЕВА 2, к.м.н.

1 Городская клиническая больница №1 им. Н.И. Пирогова, Москва

2 Кафедра оториноларингологии Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова, Москва

ПРЕПАРАТЫ СЕРЕБРА

В ЛЕЧЕНИИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ НОСА

В статье рассмотрены особенности антибактериального, фунгицидного и противовирусного механизмов действия препаратов серебра, а также причины востребованности препаратов этой группы в условиях современной медицины. Подробно представлены наиболее широко применяемые серебросодер-жащие препараты — Колларгол и Протаргол, особенности их применения при лечении воспалительных заболеваний носа в клинической практике.

Ключевые слова:

препараты серебра Протаргол

воспалительные заболевания носа

Бактерицидные свойства серебра и его соединений известны давно. Для очищения воды уже в Древней Греции и Риме использовались антибактериальные свойства серебряных сосудов и серебряных монет. В индусской аюрведической и религиозной литературе упоминается об обеззараживании воды путем погружения в нее раскаленного серебра либо при длительном контакте с металлическим серебром при нормальных условиях [1, 2]. Препараты серебра широко использовались в медицине в 20-40-е гг. прошлого столетия. С появлением антибиотиков интерес к серебросодержащим препаратам упал, но в последнее время возобновился.

Первоначальная ставка на антибиотики как на панацею не оправдала себя. Более того, широкое использование антибиотиков выявило ряд негативных факторов. Во-первых, это быстрое появление и распространение антибиотикоустойчивых штаммов микроорганизмов, что не только вызывает необходимость постоянной разработки новых антибактериальных препаратов, но и остро ставит проблему нозокомиальной инфекции с множественной лекарственной резистентностью, имеющей различную генетическую природу [3]. Во-вторых, антибактериальные препараты негативно влияют на микробиоценоз органов. Изменение микроэкологии различных органов (полости носа, глотки, кишечника и др.), являющихся естественным резервуаром индигенной микрофлоры, приводит не только к нарушению их функции, но и к выраженным патоморфологическим изменениям в организме. Это связано с тем, что одной из важнейших функций индигенной микрофлоры является ее участие в формировании колонизационной устойчивости, т. е. предотвращении заселения организма хозяина патогенными либо условно-патогенными микроорганизмами [4]. Развивающиеся вследствие широкого и порой нерационального применения антибиотиков дисбактериозы сами по себе повышают восприимчивость организма к различным заболеваниям, а потому требуют тщательной коррек-

ции. В-третьих, антибактериальные препараты не действуют на вирусы, следствием чего явился рост вирусных инфекций при необоснованно широком использовании антибиотиков.

Все эти факторы заставили клиницистов вновь обратить свое внимание на серебросодержащие препараты, отличающиеся по механизму антибактериального действия от антибиотиков и обладающие дополнительно противовирусной активностью.

Для объяснения ингибирующего действия серебра на микробную клетку было предложено три основных механизма: вмешательство в перенос электрона, связывание ДНК и взаимодействие с мембраной клетки. совет 2015 | № 15

подавляют усвоение фосфатов, угнетают функции ДНК, ингибируют трансмембранный транспорт органических и неорганических веществ [9]. Действие иона серебра на микробную клетку происходит в две стадии: 1) адсорбция; 2) активный транспорт иона в клетку. До 90% поглощенных ионов серебра задерживаются в мембране, метаболизм микробной клетки нарушается в результате инактивации ферментов и белков-переносчиков (пер-меаз). С помощью электронной микроскопии показано, что под действием ионов серебра происходят морфологические изменения в бактериальных клетках, в результате чего форма клеток искажается, на поверхности появляются пузыри [10].

Доказана эффективность препаратов серебра против разнообразных обычных грибковых патогенов (Candida albicans, Candida gLabrata и др.), что особенно важно в детской практике, т. к. при их применении не развивается дисбиоз. Самый замечательный аспект проведенных фун-гицидных экспериментов — то, что ионы серебра показали эффективность даже против стойких спор, некоторых грибов [11].

Препараты серебра обладают значительным противовирусным действием. Л.А. Кульский доказал, что серебро в концентрации 1 мг/л серебра в течение 30 с вызывает полную инактивацию вирусов гриппа штаммов А1, В и Мистрис-штамма [12]. Л.В. Григорьева показала, что полная инактивация бактериофага кишечной палочки №163, вирусов Коксаки серотипов А5, А7, А14 достигается концентрациями серебра 0,5-5,0 мг/л [13]. Кроме того, при изучении действия раствора в различных концентрациях на культурах клеток отмечено угнетение репродукции вирусов, вызывающих инфекционный ринотрахеит и вирусную диарею, в концентрации 0,25-0,5% [14].

Длительную историю применения препараты на основе серебра имеют при воспалительных заболеваниях носа. Этиологическими факторами развития острого ринита, синусита, аденоидита являются вирусы, бактерии, а в формировании хронического процесса большую роль, помимо бактерий, начинает играть грибковая флора. Уникальные особенности антибактериального, противогрибкового и противовирусного действия серебросодер-жащих препаратов обуславливают их широкое применение в комплексной терапии этих заболеваний в детской и взрослой практике. Наибольшее распространение получили препараты коллоидного серебра, к которым относятся Колларгол и Протаргол.

Серебро химически связывает скелетные и функциональные протеины бактерий в виде органических сульфидов, а также производит структурные изменения в бактериях и взаимодействует с нуклеиновыми кислотами

Колларгол (Collargolum; син. Argentum coloidale) представляет собой зеленовато- или синевато-черные пластинки с металлическим блеском с 70-75%-ным содер-

жанием серебра, растворимые в воде с образованием коллоидного раствора. Применяется наружно в виде 1-2%-ного раствора.

Протаргол (ProtargoLum; син. Argentum proteinicum) -коричневый аморфный порошок, легко растворимый в воде, содержит 7-8% серебра. Применяют наружно в виде 1-2%-ного раствора. Протаргол также оказывает вяжущее действие на слизистую носа. В основе этого действия Протаргола лежит образование защитной пленки из альбуминатов, что изменяет поверхностное натяжение слизистой оболочки и приводит к снижению ее чувствительности к инфекционным агентам, а также уменьшает просвет капилляров, тем самым тормозя воспалительные процессы. Это объясняет слабовыраженный сосудосуживающий эффект Протаргола — не вызывает осложнений в виде медикаментозного ринита при длительном применении [15]. В аптечные прописи Протаргол вошел с 1964 г. в форме 2%-ного раствора. За годы практики он зарекомендовал себя как высокоэффективное средство и снискал самые положительные отзывы специалистов.

Уникальные особенности антибактериального, противогрибкового и противовирусного действия серебросодержащих препаратов обуславливают их широкое применение в комплексной терапии этих заболеваний в детской и взрослой практике

Многочисленные клинические исследования подтвердили эффективность Протаргола в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, таких как Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Moraxella catarrhalis, грибковая флора. совет 2015 | № 15

шим образом проявляются противовирусный и вяжущие свойства протеината серебра [18, 19].

При остром рините детям младше 6 лет Протаргол назначают по 1-2 капли 3 р/сут, взрослым и детям старше 6 лет — по 2-3 капли 3 р/сут. У детей старше 6 лет и взрослых допустимо использование спрея (по 1 впрыску 3 р/сут). Длительность применения при остром процессе обычно составляет 1 нед., при хроническом рините — 14 и более дней [20].

При промышленном производстве Протаргола серебро сначала связывают с белковым субстратом, который затем высушивают, получая при этом сухой экстракт, подлежащий длительному хранению

Среди побочных эффектов препаратов серебра можно отметить аллергические реакции. В связи с этим перед применением следует нанести небольшое количество средства на локтевой сгиб для выявления индивидуальной непереносимости его компонентов. Следует особенно отметить, что за полувековую практику применения раствора Протаргола не было зафиксировано случаев накопления серебра в организме и развития аргироза.

Одним из существенных недостатков Протаргола является необходимость использовать его только свежим. Срок годности с момента приготовления не превышает 30 дней. Это связано с тем, что полученные после приготовления раствора активные ионы серебра постепенно переходят в связанное состояние, теряя свою активность в качестве окислителей. При промышленном производстве Протаргола серебро сначала связывают с белковым субстратом, который затем высушивают, получая при этом

сухой экстракт, подлежащий длительному хранению. Продаваемый же в аптеке раствор Протаргола изготавливают непосредственно в производственном отделе аптеки из сухого экстракта путем его растворения в дистиллированной воде в определенной пропорции, что переводит ионы серебра в активное состояние из белковых комплексов в воду в результате реакции диссоциации. Приобрести сухой экстракт и самостоятельно его развести до последнего времени было невозможно в связи с тем, что необходимо соблюдение методики приготовления и точное взвешивание всех необходимых ингредиентов. Это приводило к тому, что в небольших аптеках, не имеющих свой производственный отдел, Протаргол не продавался, что значительно ограничивало его распространение и использование.

В 2013 г. была разработана и запатентована инновационная форма выпуска Протаргола — таблетка для приготовления раствора. Именно она входит в стандартизированный комплект для индивидуального приготовления 2%-ного раствора Протаргола. Способ приготовления 2%-ного раствора предельно прост и доступен каждому: во флакон вливают растворитель, входящий в комплект, добавляют таблетку и взбалтывают до полного растворения таблетки (8-10 мин), после средство готово к применению.

Таким образом, огромный опыт применения препаратов серебра, подкрепленный многочисленными клиническими испытаниями, свидетельствует об их высокой эффективности и удовлетворительном профиле безопасности в лечении инфекционно-воспалительных заболеваний носа и околоносовых пазух у детей и взрослых. Их рациональное применение способствует быстрому купированию воспаления слизистой оболочки, не только улучшая самочувствие, но и снижая риск развития возможных осложнений.

ЛИТЕРАТУРА

1. Lansdown AB. Silver in health care: Antimicrobial effects and safety in use. Curr Probl Dermatol. 2006. 33: 17-34.

2. Brett DW. A discussion of silver as an antimicrobial agent: alleviating the confusion. Ostomy Wound Manage, 2006. 52(1): 34-41.

3. Страчунский Л.С. р-лактомазы расширенного спектра — быстро растущая и плохо осознаваемая угроза. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер., 2005. 1: 2-6.

4. Хавкин А. И., Жихарева Н. С. Терапия антибио-тик-ассоциированного дисбактериоза. Рус. мед. журн, 2006. 14(19): 1386-1389.

5. Tilton RC, Rosenberg B. Reversal of the silver inhibition of microorganisms by agar. Appl Environ Microbiol, 1978. 35(6): 1116-20.

6. Trevors JT. Silver resistance and accumulation in bacteria. Enzyme Microb Technol, 1987. 9: 331-33.

7. Batarseh KI. Anomaly and correlation of killing in the therapeutic properties of silver (I) chelation with glutamic and tartaric acids. J Antimicrob Chemother, 2004. 54(2): 546-8.

8. Wells TN, Scully P, Paravicini G, Proudfoot AE, Payton MA. Mechanism of irreversible inactiva-tion of phosphomannose isomerases by silver ions and flamazine. Biochemistry, 1995. 34(24): 7896-903.

9. Савадян Э.Ш., Мельникова В.М., Беликов Г.П. Современные тенденции использования серебросодержащих антисептиков. Антибиотики и химиотерапия, 1989. 11(34): 874-878.

10. Каннер Е.В., Усенко Д.В., Максимов М.Л., Горелова Е.А. Современные подходы к терапии острого ринофарингита у детей. Рус. мед. журн., 2014. 21: 1541-1543.

11. Wright JB, Lam K, Hansen D, Burrell RE. Efficacy of topical silver against fungal burn wound pathogens. Am J Infect Control, 1999. 27(4): 344-50.

12. Кульский П.А. Серебряная вода. К.: Наук. думка, 1987.

13. Григорьева Л.В. Санитарная бактериология и вирусология водоемов. М., Медицина, 1975.

14. Coward JE, Carr HS, Rosenkranz HS. Silver sulfadiazine: effect on the ultrastructure of Pseudomonas aeruginosa. Antimicrob Agents Chemother, 1973. 3(5): 621-4.

15. Щербаков А.Б., Корчак Г.И., Сурмашева Е.В., Скороход И.М., Михиенкова А.И. Препараты серебра: вчера, сегодня, завтра. Фармацевт. журн., 2006. 5: 45-57.

16. Morrill K, May K, Leek D, Langland N, Jeane LD, Ventura J, Skubisz C, Scherer S, Lopez E, Crocker E, Peters R, Oertle J, Nguyen K, Just S, Orian M, Humphrey M, Payne D, Jacobs B, Waters R, Langland J. Spectrum of antimicrobial activity associated with ionic colloidal silver. J Altern Complement Med. 2013. 19(3): 224-31. doi: 10.1089/acm.2011.0681.

17. Крюков А.М., Ивойлов А.Ю., Кунельская В.Я., Шадрин Г.Б., Мачулин А.И. Экспериментальное обоснование применения новых методик при терапии грибковых аденоидов у детей. Вестн. оторинолар., 2014. 4: 49-51.

18. Зверева Н.Н. Инфекционно-воспалительные заболевания носоглотки и придаточных пазух носа при ОРЗ. Рус. мед. журн., 2014. 22(25): 1854-1857.

19. Davenport HA. Protargol; old and new. Stain Technol, 1948. 23(4): 219.

20. Сичинава И.В. Протаргол в лечении риноси-нусита у детей. Рус. мед. журн., 2015. 23(14): 844-846.

Насморк у беременных: что предложить? | Советы беременным женщинам и кормящим мамам | Советы специалистов | Тематические страницы

Насморк у беременных: что предложить?

Насморк, или ринит – явление весьма распространенное и чаще всего не влекущее за собой серьезных последствий. Поэтому отношение к отечности и заложенности носа, постоянным выделениям и чиханию у нас обычно достаточно легкомысленное – само пройдет… И только когда совсем уж нет сил терпеть – люди обращаются в аптеку за различными каплями и спреями, благо ассортимент вполне эффективных средств для борьбы с насморком нынче достаточно широк.

Однако бывают случаи, когда эти средства противопоказаны, и один из самых распространенных – беременность. В этот непростой период своей жизни женщины особенно беспокоятся о здоровье – и своем, и будущего ребенка, поэтому достаточно нервно реагируют буквально на каждый чих, а тем более – на такой выраженный симптом различных заболеваний, как насморк. Между тем с ним сталкиваются, по разным данным, не меньше трети будущих матерей, причем у многих ринит сохраняется длительное время. Что же можно им рекомендовать и как это лучше всего сделать? Попробуем разобраться.

Насморк при беременности – норма или опасность?

Самая распространенная причина насморка при беременности – гормональная: в плаценте вырабатывается огромное количество женского полового гормона эстрогена, который оказывает влияние и на ЦНС, и на сосудистую систему. Воздействие эстрогена приводит к расширению сосудов, увеличению проницаемости их стенок для воды и как результат – к отекам, не в последнюю очередь – слизистой оболочки носовой полости, которая снабжается кровью за счет огромного количества тонких капилляров. Жидкость скапливается в межклеточном пространстве, нос набухает (причем это заметно и по состоянию кожи), дыхание затрудняется, появляется характерное сопение (усиливающееся при физических нагрузках и во время отдыха лежа, в т.ч. ночью). Такое состояние при беременности развивается далеко не всегда (предрасположенность к нему зависит и от общего уровня гормонов, и от перенесенных до беременности заболеваний, в т.ч. простудных, и даже от особенностей нервной системы, взаимосвязанной с гормональной регуляцией), но часто, оно даже получило название ринит беременных. Развивается он обычно не раньше 6-й недели, как правило, во второй половине срока беременности, иногда проходит самопроизвольно (вслед за дальнейшими гормональными изменениями), а иногда продолжается до первой недели после родов.

Меняется при беременности и иммунная система. Так что даже у тех будущих мам, которые раньше не были знакомы с аллергией, могут обнаружиться те или иные реакции на аллергены (чаще всего бытовые или пищевые) с соответствующими неприятными последствиями, включая насморк с обильными выделениями (чаще всего – прозрачными и водянистыми), чиханием, слезотечением, иногда с кожным зудом и характерным раздражением слизистой носа. В таких случаях нужно прежде всего выявить и устранить аллерген, а лечение должен обязательно назначать врач: обычные противоаллергические средства при беременности чаще всего противопоказаны или должны назначаться в особых формах и дозировках!

При этом не надо забывать и о том, что даже нормальный ринит беременных – состояние хоть и обычное, но не такое уж безобидное: затруднение дыхания сказывается на здоровье и матери, и ребенка (вплоть до влияния на внутриутробное развитие), чихание при насморке вызывает резкие сокращения диафрагмы, да и сам по себе насморк может испортить и сон, и аппетит, и настроение. Кроме того, при постоянном и выраженном отеке может развиться синусит, а дыхание ртом (как и изменение иммунного статуса) способствует развитию респираторных заболеваний, одним из первых симптомов которых может также оказаться насморк – но на этот раз инфекционный…

Инфекция в носу

Инфекционный насморк возникает у беременных довольно часто, обычно на фоне ОРЗ или ОРВИ, при этом первые признаки инфекционных заболеваний могут быть скрыты наличием вазомоторного или аллергического ринита. Поэтому при любом насморке будущей матери нужно обращаться к врачу, чтобы точно установить причину и своевременно начать лечение. Инфекционный ринит при беременности обычно сопровождается повышением температуры тела, наличием слизистых или гнойных выделений (в отличие от водянистых в других случаях), может отмечаться боль в горле, кашель и прочие симптомы простуды. Кроме того, общее ослабление организма способствует распространению инфекции на пазухи и переходу ринита в инфекционный гайморит или фронтит, что особо опасно, поскольку эти заболевания могут не только стать хроническими, но и послужить причиной внутриутробного инфицирования ребенка, преждевременных родов или выкидыша. Поэтому лечение при инфекционном рините нужно начинать как можно раньше – и в первую очередь оно должно быть направлено на устранение основной причины заболевания, а выявлять ее (как и назначать соответствующие антибиотики или противовирусные препараты) должен только лечащий врач с учетом особенностей состояния пациентки.

При этом традиционные средства для симптоматического лечения насморка – классические сосудосуживающие препараты – в большинстве случаев беременным противопоказаны, и применяются только тогда, когда их уже нельзя не применять: если польза от их применения превышает возможный вред для здоровья и матери, и ребенка. Особую опасность при этом представляет возможный рефлекторный спазм капилляров не только в носовой полости, но и в плаценте, что может привести к кислородному голоданию плода и нарушению его развития. Поэтому при отпуске таких лекарств отнюдь не лишним будет предупреждение о противопоказаниях: например, можно поинтересоваться, для кого оно предназначено, и если его берут для женщины детородного возраста – уточнить, не беременна ли она: зачастую к противопоказаниям в инструкциям покупатели относятся невнимательно, особенно если используют в порядке самолечения лекарство, неоднократно проверенное на себе и близких.

В некоторых источниках можно найти рекомендации по применению для самостоятельного лечения насморка у беременных тех или иных относительно безопасных препаратов – однако в официальных инструкциях к этим препаратам либо однозначно указано противопоказание при беременности, либо требуется обязательное назначение лечащим врачом. Не менее опасны могут быть и народные средства, в т.ч. и проверенные в других случаях: так, например, такое популярное домашнее лекарство, как сок алоэ, безопасно в большинстве случаев, но у беременных способно спровоцировать такие осложнения, как гипертонус матки и прилив крови к тазовым органам. Вообще безопасность растительных средств (в частности эфирных масел) в этом случае крайне относительна – они способны вызвать аллергические реакции, так что применять их нужно с крайней осторожностью и в минимальных дозировках. Промывание соками (морковным, свекольным и т.п.), растительными настоями и прочими средствами, приготовленными без стерилизации (хотя бы кипячением) может послужить дополнительным источником инфекции – об этом иногда тоже стоит предупредить покупателей, особо увлеченных растительными средствами.

Что же предложить?

Одним из самых безопасных и в то же время эффективных средств для лечения (и, что не менее важно, профилактики) инфекционного ринита у беременных является промывание солевыми растворами – физиологическим, морской водой. Действие их основано не только на непосредственном разжижении и удалении содержимого носовой полости, но и на разнице осмотических давлений, за счет которой уменьшается отек слизистой оболочки.

С осторожностью (учитывая возможные индивидуальные реакции и по назначению врача) можно применять препараты на растительной основе – как для впрыскивания в нос , так и для нанесения на кожу крыльев носа (мази и роликовые карандаши).

С теми же мерами предосторожности можно проводить ингаляции с использованием эфирных масел, однако нужно предупредить о том, что горячие ингаляции при беременности не рекомендуются, а ряд тепловых и местнораздражающих процедур противопоказан – например, нельзя парить ноги, накладывать горчичники и т.п. Поэтому лучше использовать холодные ингаляции, в т.ч. при помощи современных приборов – например, небулайзеров, в качестве растворов для которых можно использовать все те же солевые препараты.

И обязательно нужно предупредить будущую маму о том, что если через 2–3 дня после использования любого средства не наступит облегчение, нужно обязательно обратиться к врачу для коррекции лечения.

Новое на сайте

какие капли посоветовать посетителю аптеки?

Насморк – достаточно частая причина обращения в аптеку, особенно в холодный сезон. Ринит редко бывает самостоятельным заболеванием, чаще он развивается как следствие воспалительных процессов в околоносовых пазухах (гайморит, фронтит), а также в глотке (фарингит, тонзиллит). Поэтому провизор должен знать основные группы лекарственных препаратов, которые используются для лечения ринита, а также особенности их приема. Поможет разобраться в этих вопросах Владимир Янчук, врач-терапевт Буковинского медицинского центра «Моя семья».

Дифференцируем ринит за первым столом

Риниты встречаются настолько часто, что их пришлось систематизировать. Вначале их делят на две большие группы: инфекционные и неинфекционные. Инфекционный ринит бывает острым (длится до семи дней, развивается в ответ на попадание в организм различных вирусов или бактерий, а также в результате общего переохлаждения организма и снижения иммунитета) и хроническим (является результатом неправильного лечения острого ринита и встречается у взрослых). Неинфекционный ринит, в свою очередь, делят на вазомоторный и аллергический. В основе вазомоторного ринита лежит нарушение вегетативной регуляции, которое провоцирует расширение сосудов нижних носовых раковин, вызывающее отек и заложенность носа. При аллергическом рините насморк появляется внезапно, сопровождается обильным выделением слизи, зудом и частым чиханием. Этот тип насморка может периодически повторяться при наличии в воздухе аллергена. 

Прежде чем рекомендовать больному препарат от насморка, провизор должен расспросить его о состоянии здоровья и имеющихся жалобах, чтобы отфильтровать те заболевания, при которых больного следует отправить на консультацию к врачу. Симптомы, вызывающие настороженность:

• кровянистые выделения из носа могут быть признаком травмы, наличия инородного тела или заболевания крови;
• насморк сочетается с кашлем, который продолжается более недели, особенно если кашель сопровождается отделением густой с примесью крови мокроты, приступами удушья;
• затруднение носового дыхания на фоне расстройства обоняния, болей в области лба, носа и околоносовой области – есть угроза синусита.

Провизор должен знать, что симптоматическое лечение ринита с помощью безрецептурных препаратов возможно только при остром насморке, вызванном острым респираторным заболеванием (ОРЗ), а также при аллергическом рините без системных проявлений аллергии. Во всех остальных случаях больного следует направить на консультацию к врачу.

Подтвердить связь ринита с ОРЗ могут жалобы посетителя аптеки на общую слабость, повышение температуры тела, а также наличие в анамнезе контакта с больными. Для облегчения симптомов острого насморка можно предложить сосудосуживающие капли в нос.

Как быстро избавиться от насморка

Симпатомиметики при местном применении достаточно быстро оказывают сосудосуживающее действие, способствуют уменьшению отека и гиперемии слизистой полости носа, уменьшают количество отделяемого секрета, облегчают носовое дыхание. При всем богатстве выбора и популярности у посетителей аптеки препаратов этой группы следует помнить, что симпатомиметики не так просты, особенно неселективные. Они влияют на функции многих органов и систем, в частности, на центральную нервную систему (ЦНС). Ярким представителем этой группы препаратов является фенилпропаноламин, при использовании которого даже рекомендуется не садиться за руль, поскольку возможны проблемы с вниманием.

Селективные же симпатомиметики гораздо лояльнее, поскольку действуют избирательно и значительно меньше вмешиваются в работу ЦНС. С этой группой стоит познакомиться поближе. Селективные симпатомиметики делятся на препараты:

• короткого действия (4-6 часов) – эфедрин, нафазолин, фенилэфрин, тетразолин;
• среднего действия (8-10 часов) – ксилометазолин;
• длительного действия (более 12 часов) – оксиметазолин.

Классическими представителями селективных симпатомиметиков являются проверенные временем и доступные по цене препараты ксилометазолина, которые широко используются при лечении острого ринита. Однако, богатая история их применения отнюдь не означает, что они подходят всем. Капли для носа, содержащие ксилометазолин, нельзя использовать для лечения острого ринита у детей в возрасте до 2-х лет, а также они противопоказаны людям, имеющим закрытоугольную глаукому, артериальную гипертензию, выраженный атеросклероз, тахикардию, гипертиреоз. Отпуская ксилометазолин в каплях, нужно отдельно обратить внимание покупателя на то, что увеличивать дозу и/или частоту приема самостоятельно ни в коем случае нельзя – это может делать только врач.

Препарат у пациентов с гиперчувствительностью к адреномиметикам может вызывать бессонницу, головокружение, тремор, нарушение сердечного ритма и повышение артериального давления. Провизор должен предупредить клиента аптеки, что продолжительное (более 2 недель) применение ксилометазолина часто приводит к вторичному расширению кровеносных сосудов и впоследствии к вторичному медикаментозному риниту. С осторожностью следует применять препарат при сахарном диабете, стенокардии III-IV функционального класса, гиперплазии предстательной железы, феохромоцитоме. Обо всех этих особенностях «поведения» ксилометазолина обязательно предупредите покупателя.

Не безгрешен ксилометазолин и в «общении» с другими лекарственными средствами. Сотрудник аптеки должен напомнить больному, что препарат несовместим с ингибиторами моноаминоксидазы и трициклическими антидепрессантами. При одновременном применении ксилометазолина с другими симпатомиметиками происходит потенцирование действия, поэтому данных комбинаций следует избегать.

Препарат противопоказан при беременности. Кормящим мамам следует рекомендовать при насморке другие препараты, например, на растительной основе. 

Капли от насморка на травах

Пациентам, которые имеют противопоказания к назначению симпатомиметиков, а также людям из групп риска можно рекомендовать препараты на растительной основе. Эти лекарственные средства оказывают противомикробное, противовоспалительное, противоотечное действие. В начале лечения эти капли могут применяться часто, например, каждый час, а далее 3-4 раза в сутки.

В нашей стране при лечении острого насморка широко используется препарат на растительной основе «Пиносол» в форме назальных капель. В его состав входит масло сосны обыкновенной, масло эвкалиптовое, тимол, альфа-токоферола ацетат, масло мяты перечной, гвайазулен.

Провизору необходимо предупредить посетителя аптеки, что детям до 2 лет препарат не назначают. «Пиносол» противопоказан при аллергическом рините, а также при повышенной чувствительности к компонентам препарата. Из побочных эффектов возможны зуд, чувство жжения, гиперемия и отек слизистой носа – не забудьте напомнить об этом покупателю.

«Пиносол» можно применять при насморке беременным, а также кормящим мамам по показаниям.

Местные антисептики как альтернатива симпатомиметикам и фитопрепаратам

Если у больного есть противопоказания к назначению симпатомиметиков и при этом имеется повышенная чувствительность к компонентам растительных препаратов, то провизор может порекомендовать таким клиентам при насморке назальные капли из группы местных антисептиков, например, «Протаргол». Действующим веществом препарата является протеинат серебра (в100 г раствора лекарственного средства содержится 2 г серебра протеината), благодаря чему он обладает антибактериальным, бактериостатическим, противоотечным, противовоспалительным действием.

Провизор должен предупредить посетителя аптеки, что нельзя применять «Протаргол» при повышенной чувствительности к компонентам препарата, а также во время беременности и в период кормления грудью. Эти капли очень любят покупать родители для лечения малышей, будучи уверены, что они не могут навредить. Однако «Протаргол» можно рекомендовать детям только от 3 лет в тех же дозах, что и взрослым пациентам – напомните об этом покупателю. «Протаргол» в форме назальных капель нельзя использовать более 7 дней.

Препараты для лечения аллергического ринита

В комплекс медикаментозной терапии при аллергическом рините входят уже знакомые нам симпатомиметики, блокаторы Н1-рецепторов гистамина в форме назального спрея и их комбинации в форме назальных капель («Санорин», «Алергодил», «Виброцил», «Санорин-Аналергин»).

При аллергическом насморке у нас широко применяют назальные капли «Виброцил» (симпатомиметик фенилэфрин+блокатор Н1-рецепторов гистамина диметинден малеат). Провизор должен напомнить покупателю, что противопоказаниями к назначению этого лекарственного средства являются атрофический ринит, закрытоугольная глаукома, повышенная чувствительность к фенилэфрину, диметиндену малеату и другим компонентам препарата. С осторожностью следует использовать капли «Виброцил» при артериальной гипертензии, аритмии, генерализованном атеросклерозе, гипертиреозе, аденоме предстательной железы, сахарном диабете, эпилепсии. Первостольник обязан предупредить покупателя, что с особой осторожностью эти капли следует применять пациентам с повышенной чувствительностью к симпатомиметикам. «Виброцил» нельзя использовать для лечения аллергического ринита у детей в возрасте до года, а также у беременных и кормящих матерей – не забудьте и об этом предупредить клиента. Препарат несовместим с ингибиторами моноаминоксидазы, трициклическими антидепрессантами, бета-адреноблокаторами. Отпуская капли, нужно отдельно напомнить посетителю аптеки, что увеличивать дозу и/или частоту приема, а также использовать капли более 7 дней подряд можно только с разрешения врача.

Если у пациента с аллергическим ринитом есть противопоказания к назначению симпатомиметиков, то порекомендуйте ему назальный спрей «Алергодил», который хорошо зарекомендовал себя. Но препарат нельзя использовать для лечения аллергического ринита у детей в возрасте до 6 лет, беременных и женщин, кормящих грудью – не забудьте предупредить об этом клиента аптеки. С осторожностью следует назначать назальный спрей пациентам с нарушенной функцией почек.

экспериментальные препараты и особая еда

Всемирная организация здравоохранения предупреждает: лучший способ избежать встречи с коронавирусом — мыть руки с мылом или обрабатывать их антисептиком на основе 60—70% спирта и соблюдать социальную дистанцию.

Даниил Давыдов

разобрался с сомнительными лекарствами

Я пишу эту статью 22 мая 2020 года. На сегодня лекарства от коронавирусной инфекции не существует. А поскольку клинические испытания любого препарата занимают до 10 лет, то в ближайшее время панацея вряд ли появится.

Зато в интернете уже вовсю советуют якобы рабочие способы победить коронавирус. Самостоятельно покупать и использовать описанные в статье и любые другие лекарственные препараты и народные средства в лучшем случае бесполезно, а в худшем — опасно для здоровья.

Ну и что? 27.03.20

Самые важные вопросы про коронавирус

Я собрал список лекарств, покупать которые не стоит.

Сходите к врачу

Наши статьи написаны с любовью к доказательной медицине. Мы ссылаемся на авторитетные источники и ходим за комментариями к докторам с хорошей репутацией. Но помните: ответственность за ваше здоровье лежит на вас и на лечащем враче. Мы не выписываем рецептов, мы даем рекомендации. Полагаться на нашу точку зрения или нет — решать вам.

Гидроксихлорохин

Что это такое. Гидроксихлорохин — препарат для лечения малярии и аутоиммунных заболеваний.

Сколько стоит. Гидроксихлорохин есть в перечне жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов (ЖНВЛП), то есть цены на него регулирует государство. Предельная отпускная цена производителя — 916,48 Р.

В России препарат с международным непатентованным наименованием (МНН) «гидроксихлорохин» зарегистрировали четыре фармацевтических компании-производителя. Препарат известен под двумя торговыми именами: «Плаквенил» и «Иммард»

Как это должно работать. В начале 2020 года китайское правительство отчаянно искало средство от коронавирусной болезни. Китайские врачи попытались использовать хлорохин и другие его соединения — и пришли к выводу, что противомалярийные лекарства способны подавлять размножение вирусов SARS-CoV-2 в пробирке.

Затем группа китайских ученых сообщила, что усовершенствованная версия хлорохина — гидроксихлорохин — работает так же, как хлорохин, но действует мягче и безопаснее. Хотя результат был получен в лабораторных условиях, а более поздние эксперименты показали, что лекарство не работает на живых мышах и людях, заявления оказалось достаточно, чтобы правительства многих государств, в том числе США и России, сочли лекарство перспективным и разрешили применять его для экспериментального лечения пациентов с коронавирусной болезнью.

Почему не стоит покупать. Международные рекомендации советуют не использовать гидроксихлорохин вне стен больниц. Крупных клинических испытаний лекарства в отношении коронавируса пока никто не проводил, так что лечение считается экспериментальным. Непонятно, работает ли оно вообще — и если все-таки работает, то как именно: малярию, против которой препарат эффективен, вызывают одноклеточные паразиты, а не вирусы. У гидроксихлорохина бывают серьезные побочные эффекты — от головной боли, отеков и поноса до потери слуха и утраты ночного зрения. Кроме того, если раскупят весь препарат, он не достанется тем, кому действительно нужен и помогает: пациентам с ревматоидным артритом, системной красной волчанкой и фотодерматитом.

Руководство по лечению коронавирусной болезни — Национальные институты здравоохранения США

Лучше быть здоровым и богатым

Рассказываем, как выбрать хорошего врача и не платить за лишние анализы. Дважды в неделю — в вашей почте вместе с другими статьями о деньгах. Подпишитесь, это бесплатно

Другие экспериментальные препараты. Все остальные лекарства против коронавирусной болезни тоже экспериментальные: надежных клинических испытаний, подтверждающих их безопасность и эффективность, пока нет. Врачи применяют их в надежде помочь тяжелобольным.

Это относится, например, к ремдесивиру (Remdesivir), ингибиторам интерлейкина-6 — в том числе сарилумабу (Sarilumab) и силтуксимабу (Siltuximab), интерферонам (IFN-α2β и IFN-β1b) и плазме переболевших коронавирусной болезнью людей.

Серьезных научных работ, подтверждающих эффективность препарата «Арбидол» против коронавирусной болезни, тоже нет. Предыдущие испытания, подтверждающие противовирусную активность этого препарата, международное медицинское сообщество сочло недостаточно убедительными.

В рекомендациях ВОЗ какие-либо лекарства от COVID-19 отсутствуют.

Блокатор вирусов

Что это такое. Бейдж или значок, внутри которого находится саше, пропитанное диоксидом хлора или хлоритом натрия. Попросту говоря, это бейджик с хлоркой.

Сколько стоит. 900—2000 Р за штуку.

Блокаторы вирусов выпускают российские и японские компании. Состав и принцип действия у них один и тот же

Как это должно работать. Хлорка — хороший дезинфектант и может разрушать оболочки вирусов. На этом принципе основан антисептический эффект отбеливателя. При этом хлорка работает не только в виде раствора, но и в виде газа.

В 2008 году японские исследователи провели интересный эксперимент. Они взяли две группы по 10 мышей и рассадили их по двум камерам. В одну камеру подавали взвесь из вирусов гриппа типа А, а во вторую — взвесь из вирусов и газообразный диоксид хлора (ClO₂) в безопасной для человека концентрации. В результате все «хлорированные» мыши выжили, а 7 из 10 контрольных мышей погибли от гриппа. Из этого авторы сделали вывод, что газообразный ClO₂ уменьшает количество вирусных частиц в окружающей среде, поэтому им стоит обрабатывать общественные места во время эпидемии гриппа.

Эту идею подхватили производители блокаторов — в том числе российские. Одна из компаний-производителей утверждает, что благодаря испарениям хлорки их бейдж «эффективно обеззараживает личное воздушное пространство объемом 1 метр кубический» — причем защита держится в течение 30 дней.

Почему не стоит покупать. Коронавирусы рассеиваются на 1—2 метра с частицами слюны, когда больной кашляет, чихает или смеется. Люди заражаются, вдыхая вирусный аэрозоль или прикасаясь к вещам, которые потрогал больной. Теоретически бейдж мог бы подействовать двумя путями: защищая вдыхаемый воздух и обеззараживая поверхности вокруг человека.

На практике это не работает: газообразный диоксид хлора тяжелее воздуха. Если прицепить бейджик к пиджаку или кофте, вся хлорка из него «утечет» на пол, так что висящий на высоте лица аэрозоль с вирусами обезвредить не получится. Вирусы на предметах хлор из бейджа убить тоже не сможет, потому что при взаимодействии с воздухом диоксид хлора быстро распадается. Да и само «защитное облако» нестойкое: производитель пишет, что «на открытом воздухе эффективность может быть ниже из-за влияния ветра». Это значит, что для обеззараживания предметов блокатор не годится.

Газообразная хлорка защитила мышей от гриппа, потому что исследователи посадили их в непроницаемую для воздуха камеру, в которую подавали порцию диоксида хлора сверху, как из душа. Мышам волей-неволей приходилось им дышать. Ветер ClO₂ не сдувал, так что концентрация и эффективность обеззараживающего облака были гораздо выше, чем у бейджа на открытом воздухе.

Красная стрелка показывает, что газообразный хлор из генератора поступает в мышиную камеру сверху и облако накапливается у мордочки животного. Источник: microbiologyresearch.org

Продукты с коллоидным серебром

Что это такое. Коллоидное серебро — взвесь из мельчайших частиц серебра в какой-нибудь жидкости, обычно в воде или этиловом спирте. На его основе делают пищевые добавки, растворы для полоскания и закапывания в нос и даже зубную пасту.

Сколько стоит. От 120 до 3500 Р в зависимости от объема.

Помимо дорогих биодобавок в нашей стране популярен дешевый препарат «Протаргол». Хотя в инструкции написано, что в состав «Протаргола» входит «протеинат серебра», по сути это все то же коллоидное серебро

Как это должно работать. По заявлению производителя, коллоидное серебро — эффективный антисептик: «подавляет жизнедеятельность патогенных бактерий, вирусов и грибков и паразитов». Для профилактики коронавирусной болезни коллоидное серебро советуют закапывать в нос 2—3 раза в день. А еще рекомендуют полоскать им горло при простуде.

Почему не стоит покупать. Коллоидное серебро никакой противовирусной активностью не обладает. FDA предупреждает: ни один продукт с коллоидным серебром коронавирусную болезнь не лечит, а те, кто утверждает обратное, — мошенники.

Коллоидное серебро в принципе не годится для профилактики и лечения болезней. От него нет пользы для здоровья, но может быть вред: со временем серебро накапливается в коже и придает ей серо-голубой оттенок — это называется «аргирия». Обычно это никак не вредит, но у некоторых людей с аргирией серебро повреждает почки и провоцирует судороги.

Пол Карсон заболел аргирией, потому что 14 лет пил коллоидное серебро и наносил его на кожу. Его прозвали «папа Смурф». Источник: Wired

БАДы с витаминами и минералами

Что это такое. БАД — биологически активная добавка к пище. Пищевые добавки бывают разного состава: в основном в БАДы входят витамины и микроэлементы.

Сколько стоит. 150—500 Р за упаковку, цена зависит от состава.

БАД — не лекарство, поэтому продавать БАДы можно в любом онлайн-магазине

Как это должно работать. Согласно заявлениям некоторых экспертов и СМИ, прием витаминов А и Е укрепляет слизистую, так что туда не могут проникнуть коронавирусы, витамин С и цинк «усиливают иммунитет», способствуя противовирусной защите, а добавки со смесью витаминов и минералов в принципе укрепляют здоровье.

Почему не стоит покупать. Ни один БАД не предназначен для диагностики, лечения или предотвращения заболеваний — строго говоря, это еда, а еда болезни не лечит и с вирусами не борется.

Все продукты, в которых содержатся вещества с доказанными противовирусными свойствами, уже превратились в лекарства. Все, что не превратилось, фармацевтическая промышленность считает бесперспективным: это касается лекарственных трав вроде эхинацеи и женьшеня, лимона и других продуктов с витамином С, имбиря и чеснока.

ГОСАПТЕКА: эффективные препараты без консервантов по доступным ценам

ГОСАПТЕКА: эффективные препараты без консервантов по доступным ценам

Может ли эффективное средство стоить недорого? Есть ли безопасные средства для ухода за новорожденными? Где купить косметику без парабенов и консервантов? На эти и другие вопросы омичей отвечает генеральный директор аптечной сети ГОСАПТЕКА Игорь Викторович БОГДАШИН.

— Только в ГОСАПТЕКАХ сохранились рецептурно-производственные отделы, в которых провизоры и фармацевты изготавливают препараты по так называемым индивидуальным прописям. Разве такое производство не дороже фабричного?
— Кажется, что раз уж препарат изготовлен специально для вас, по индивидуальному рецепту, то его цена должна быть непременно выше. Но это заблуждение. Покупая лекарство, приготовленное в аптеке, вы точно не переплачиваете за упаковку и рекламу — а это львиная доля расходов производителя. Зато эффективность вручную изготовленных лекарств, например аптечного антигриппина, препаратов серебра, проверена десятками лет.

— Педиатр выписал ребенку протаргол. Что это за средство и где его можно купить?
— Капли протаргол — это препарат серебра, изготавливаемый по индивидуальному рецепту нашими фармацевтами прямо в аптеке. Обладает ярко выраженным антисептическим, бактерицидным, противовоспалительным действием. Эффективно лечит насморк и воспаления, дозировки бывают разные, в зависимости от возраста — для детей и взрослых. Срок хранения у препаратов серебра небольшой, поэтому их традиционно выпускают только производственные аптеки. Сейчас появились заводские аналоги протаргола — для получения раствора пациент должен самостоятельно развести сухой препарат водой. Однако стоят фабричные лекарства дороже. Капли протаргол продаются в сети ГОСАПТЕКА в Омске и Омской области по доступным ценам.

— Скоро у меня родится долгожданный внук. Хочется, чтобы рос он здоровеньким. Как не навредить малышу, ведь недобросовестные производители умудряются даже в детские кремы, шампуни и присыпки добавлять вредную «химию»?
— В нашей сети изготавливаются и продаются средства, в составе которых отсутствуют консерванты и другие «улучшители». По этой причине препараты имеют маленький срок годности, зато ими можно пользоваться с первых дней жизни малыша. Молодым мамам в уходе за грудничками помогут стерильная вода, стерильное масло, стерильный фурацилин для обработки глаз, присыпка ксероформ. Кстати, ксероформ незаменим и для взрослых пациентов в послеоперационный период, и для лежачих больных.

— В советских аптеках продавались различные лосьоны, мази и болтушки. Делаете ли вы косметические средства на заказ?
— Многие мази и присыпки, известные старому поколению дерматовенерологов, реально помогали и были очень популярны. Сейчас в связи с изменениями в законодательстве мы не можем пропускать их в качестве лекарственных средств, но как лечебную косметику — вполне. Женщины охотно приобретают в аптеках косметические мази и лосьоны. Особой популярностью пользуется уникальный продукт — «Маска питательная № 7». Она эффективно питает, увлажняет и подтягивает кожу, а главное — не содержит консервантов и парабенов. Также наши фармацевты изготовят косметологические средства для ухода за кожей и волосами по рецепту вашего дерматолога или косметолога.

Адреса производственных аптек:

ГОСАПТЕКА № 4 ул. 26 Северная, 19/1, тел. 79-81-88
ГОСАПТЕКА № 7 ул. Серова, 4а, тел. 31-53-92
ГОСАПТЕКА № 117 ул. 3-я Кордная, 14, тел. 57-80-20
ГОСАПТЕКА № 209 г. Калачинск, ул. Больничная, 14, тел. 8 (381-55) 213-47

Имеются противопоказания. Проконсультируйтесь со специалистом.

Как бороться с насморком › Статьи и новости › ДокторПитер.ру

Первые признаки ОРВИ – насморк и заложенность носа. Они создают множество неудобств – трудно дышать, невкусно есть, неловко общаться и уж тем более вести деловые разговоры… Бороться с насморком необходимо, и даже есть чем — аптеки завалены средствами от насморка. Мы поможем разобраться, в чем разница между этими препаратами.

Сосудосуживающие средства

Сосудосуживающие препараты (адреномиметики) не лечат, а только облегчают симптомы. Попадая на слизистую оболочку носа, они вызывают резкое сужение кровеносных сосудов. При этом уменьшается отек и скорость образования слизи, которые мешают нормальному дыханию. Дышать становится легче, но все эти препараты высушивают слизистую оболочку носа, нарушают ее питание, из-за чего кровеносные сосуды становятся тонкими, ломкими. От длительного применения адреномиметиков возможны носовые кровотечения. Их прием ограничен несколькими днями, так как к ним может возникнуть привыкание, и без «дозы» снять отек будет невозможно. Другие побочные явления: головная боль, повышение давление, учащение сердцебиения. Очень неприятное осложнение после их длительного приема – развитие вазомоторного ринита, избавиться от которого очень сложно.

Механизм действия всех сосудосуживающих препаратов одинаков, разница только во времени действия и длительности курса лечения. Сосудосуживающие препараты противопоказаны при беременности и лактации.

Самые дешевые капли в нос – те, что содержат нафазолин. Это старые и всем известные Нафтизин и Санорин. При местном применении нафазолин оказывает быстрое сосудосуживающее действие, снимает отек слизистой оболочки носа и облегчает носовое дыхание. Время действия таких препаратов около 4 часов, использовать можно не дольше  5-7 дней.

Больше всего на полках аптек ксилометазолина. Длянос, Отривин, Тизин ксило био, Ксилен, Ксимелин, Гриппостад рино, Галазолин, Ринорус отличаются друг от друга только производителем, ценой и упаковкой. Ксилометазолин тоже сужает сосуды слизистой оболочки носа и устраняет отек слизистой, но действует дольше, чем нафазолин – 8-10 часов, курс лечения не должен превышать 10 дней.

Тизин содержит сосудосуживающее вещество препарат тетризолин. Не стоит путать его с Тизином ксило био, это разные препараты с разным действующим веществом, хотя и одной группы. Он начинает действовать через несколько минут, и эффект сохраняется около 8 часов, производители не рекомендуют пользоваться им дольше 4 дней подряд.

Еще один адреномиметик – оксиметазолин — действующее вещество препаратов Назол, Називин, Саноринчик. Они обладают теми же свойствами, что и препараты, содержащие ксилометазолин, но их удобно использовать перед сном, чтобы насморк не мешал спать. Эти капли и спреи действуют в течение 12 часов, а применять их рекомендуют 3-5 дней.

Фенилэфрин входит в состав растворимых препаратов от простуды (Колдрекс, Ринза) и в состав капель Назол бэби. Препараты от простуды предназначены для снятия симптомов у взрослых и у детей старше 12 лет, а Назол бэби производители рекомендуют детям от одного года. (Фервекс, Анти флу,Терафлю, Колдакт Флю плюс, РиниКолд, Тофф Плюс тоже предназначены для снятия симптомов ОРВИ, в частности, насморка, поскольку содержат и сосудосуживающие средства. Но страдающим гипертонической болезнью принимать их необходимо с осторожностью: они могут спровоцировать спазм сосудов, повышение кровяного давления. Эти лекарства нельзя применять дольше пяти дней)  Капли Адрианол содержат два сосудосуживающих средства – фенилэфрин и тримазолин. Капли с фенилэфрином действуют около 6 часов, применять их можно 7 дней подряд.

Антибиотики

Средства, которые не только снимают симптомы, но и лечат, содержат, как правило, антибиотики или другие противовоспалительные компоненты. Например, Полидекса с фенилэфрином содержит еще и антибиотики неомицин и полимиксин В, а также противовоспалительный компонент – дексаметазон (синтетический глюкокортикоид). Этот спрей применяется при хронических воспалительных ринитах,  ринофарингитах, синуситах. Курс – 5-10 дней.

Препарат Виброцил кроме фенилэфрина содержит противоаллергический компонент диметиндена малеат. Этот препарат хорош при аллергическом рините, а вот при атрофическом он противопоказан. Виброцил применяется при аллергическом, вазомоторном, остром ринитах, для устранения отеков слизистой оболочки и в придаточных пазухах после хирургического вмешательства. Выпускается в трех формах – капли, спрей и гель. Все три формы нельзя применять дольше одной недели.

При затянувшемся насморке с гнойным отделяемым можно применять мазь Бактробан. Действующее вещество – антибиотик широкого спектра действия мупироцин. Будьте внимательны – эта мазь существует в двух формах – для кожи и для носа. Назальная мазь применяется при инфицировании золотистым стафилококком и стрептококками. Как и любой антибиотик используется 5-10 дней.

Гомеопатия

Гомеопатический спрей Эуфорбиум композитум применяется при ринитах различного происхождения, синуситах и даже евстахиитах, обладает противовоспалительным, противоаллергическим эффектами и препятствует высыханию слизистой оболочки носа, восстанавливает ее. Спрей не обладает сосудосуживающим эффектом, не раздражает слизистую оболочку, может назначаться беременным.

Эдас-131 Ринитол – российские гомеопатические капли от насморка. Эти капли обладают противовоспалительным действием, препятствуют чиханию, восстанавливают обоняние, снимают раздражение крыльев носа. Стоят недорого, применяется при любых острых ринитах и не имеют побочных действий.

Капля моря

Аква марис, Физиомер, Маример, Мореназол, Салин – это спрей и капли стерилизованной морской воды. Она не сужает сосуды, не убивает бактерии. Ее задача заключается в другом — она разжижает слизь, смывает и удаляет аллергены и болезнетворные бактерии из полости носа, смягчает слизистую оболочку. Микроэлементы, входящие в их состав, улучшают функции мерцательного эпителия. Препарат не имеет противопоказаний, его можно применять беременным и детям с первого дня жизни.

Вывод – эти препараты улучшают состояние слизистой, но не лечат. С таким же успехом можно купить в аптеке морскую соль, растворить столовую ложку в стакане воды и промывать нос. Полезно, да, но не панацея.

Масло против насморка

Смесь эфирных масел – препарат Пиносол не вызывает привыкания, обладает противомикробным действием, снимает воспаление и отек слизистой оболочки носа. Но натуральные эфирные масла, содержащиеся в нем, могут вызвать аллергию. В аптеках есть в виде капель, спрея, крема, и мази.

Персиковое и облепиховое масла полезно применять после сосудосуживающих средств для смягчения и восстановления слизистой. Полезно также закапывать смесь персикового масла и масла мяты перечной или ментола. Такие капли не только смягчают слизистую, но и обладают антисептическим эффектом.

Помните, что при ОРВИ использовать масляные капли не рекомендуется, потому что они, во-первых, не обладают сосудосуживающим действием, а во-вторых, образуют на поверхности слизистой пленку, которая склеивает реснички эпителия и препятствует работе местного иммунитета, никак не воздействуя на размножение вирусов.

Серебряная защита

Известно, что серебро обладает бактерицидным действием. Препарат Протаргол (нитрат серебра) широко применялся в лор-практике раньше. Применяется и сейчас, но купить его сложно, этот препарат изготавливается в аптеках по рецепту. Протарголом можно лечить не только насморк, но и больное горло. Препарат не вызывает зависимости, не сужает сосуды, не травмирует слизистую оболочку носа, зато убивает бактерии. Правда, отек не снимает.

Ингаляции

Избавиться от насморка или облегчить его помогает ингаляция. Для этой процедуры проще всего использовать ингалятор Махольда. Он представляет собой изогнутую стеклянную трубочку, в которую кладется эфирное масло или настой лекарственной травы, трубочка помещается в стакан с горячей водой. Дышать через нее можно и носом, и ртом, первые 5-6 вдохов должны быть неглубокими. Процедура должна проводиться каждые 2-4 часа по 4-5 минут. Длительность курса — не более 30 дней.

А вот новые ингаляторы – небулайзеры можно, конечно, использовать при ринитах, но тратить кучу денег на то, чем будете пользоваться 2-3 раза в год – нерационально. Небулайзеры созданы для лечения более серьезных заболеваний – бронхиальной астмы, муковисцидоза, хронического бронхита.

Домашняя физиотерапия

Греть нос, как это рекомендовали бабушки (вареными яйцами или горячей солью), можно только если вы уверены, что у вас нет синусита (гайморита, фронтита, этмоидита). Иначе возможны опасные осложнения. Но лучше всего при насморке – греть ноги. Существует рефлекторная связь между температурой ног и работой мерцательного эпителия.

Профилактика

ИРС-19 способствует образованию местного иммунитета, применяется не только для лечения ринитов, но и для профилактики в осенне-зимний сезон. Этот спрей назначается взрослым и детям с трех месяцев.

Еще один иммуномодулятор для профилактики и лечения синуситов, гайморитов и ринитов – Деринат. Это капли, способствующие образованию местного иммунитета и обладающие противовоспалительным действием, а также восстанавливающие поврежденную слизистую оболочку носа.

Предотвратить ОРВИ, а, следовательно, и насморк, можно используя Оксолиновую мазь. Она препятствует проникновению вируса в организм через верхние дыхательные пути и его размножению. В период эпидемий мазь 2-3 раза в день наносят на слизистую оболочку носа.

Для поднятия иммунитета часто используют препараты эхинацеи (Иммунорм, Иммунал). Эти препараты можно принимать и во время болезни, и для профилактики, но не дольше восьми недель.

Как правильно закапать нос

1. Перед тем, как закапать любые капли, нужно очистить нос от слизи (высморкаться). При этом каждую ноздрю следует очищать поочередно. Шмыгать, затягивая слизь в носоглотку, нельзя, так как в этом случае вирусы и бактерии попадут внутрь организма, а это выздоровлению не способствует.

2. Если секрет густой, лучше очистить нос с помощью препаратов из морской воды (или раствора, приготовленного в домашних условиях): закапать в нос 5-6 капель изотонического раствора, а затем аккуратно высморкаться.

3. При очень сильной заложенности носа высмаркивайтесь только после закапывания сосудосуживающих препаратов. А затем промойте нос изотоническим раствором (Аква марис, Физиомер, Маример, Мореназол, Салин).

4. При закапывании старайтесь держать голову прямо, если используете спрей (он, кстати, удобнее капель – лучше орошает слизистую носа минимальным количеством лекарства), или слегка запрокинув голову, применяя капли. Если вы закапываете нос в домашних условиях, то лягте на бок, под головой должна быть маленькая плоская подушка. Сделайте глотательное движение, но не до конца, а задержите его так, чтобы перекрыть щель между носом и глоткой, через которую «пролетает» лекарство – желудку оно ни к чему. Закапайте лекарство в ноздрю со стороны подушки и задержите дыхание. Когда эта ноздря начинает дышать, проделайте то же самое с другой.

5. Закапывайте пипеткой или флаконом-капельницей, не касаясь носа, иначе вирусы и бактерии останутся на наконечнике пипетки, и при повторном введении, когда вы уже будете выздоравливать, повторно инфицируют вас.

Как правило, труднее всего дышать в начале болезни. В этот период можно применять сосудосуживающие препараты. Но как только дышать станет легче, врачи рекомендуют перейти на ингаляции и промывания. Днем лучше применять те препараты, которые действуют 3-4 часа, а ночью – капли или спреи, действующие 8 и более часов.

Перед применением препарата обязательно посоветуйтесь с лечащим врачом.

Светлана Ларетус

© Доктор Питер

Инстилляции: когда, кому и для чего?

В амбулаторной урологии, наверное, второй излюбленной процедурой после массажа предстательной железы являются инстилляции лекарственных средств в мочевой пузырь. Причем выполняется эта процедура и мужчинам, и женщинам любого возраста, а спектр заболеваний вообще с трудом поддается перечислению — и хронические циститы, и простатиты, и уретриты, и дизурии неясной этиологии. Возможно, урологи таким образом выражают свои большие надежды на местную терапию. До недавнего времени вводимых препаратов было мало — протаргол, облепиховое масло, гидрокортизон, они применялись как отдельно, так и в составе «болтушек».В последние год-два стали появляться препараты, которые предназначены специально для внутрипузырной терапии и характеризуются созданием высокой концентрации действующего вещества на поверхности уротелия. Тем не менее, для выполнения инстилляций лекарственных веществ в мочевой пузырь должны быть строгие показания. Мы задали вопросы, касающиеся инстилляций, известному урологу, имеющему большой практический опыт лечения заболеваний нижних мочевых путей, д.м.н., проф. кафедры урологии и хирургической андрологии РМАПО Любови Александровне Синяковой.

— Любовь Александровна, как Вы считаете, есть ли место внутрипузырным инстилляциям (ВИ) в современной урологии?

— Безусловно, ВИ являются эффективным методом лечения, чаще всего в составе комбинированной терапии.

-Кому, каким пациентам, с какой пато­логией показаны ВИ?

— Как правило, это пациентки с рецидивирующими инфекциями нижних мочевых путей, поствоспалительными изменениями в мочевом пузыре по типу лейкоплакии, больные интерстициальным циститом. Отдельную группу составляют больные с опухолями мочевого пузыря, которым показана БЦЖ- терапия, внутрипузырное введение препаратов после трансуретральной резекции мочевого пузыря.

– Есть ли противопоказания для ВИ?

– Противопоказаниями для ВИ являются острые воспалительные заболевания мочевых путей, стриктуры уретры.

– Какие осложнения могут возникнуть после ВИ? Как их устранить?

– ВИ могут вызвать обострение хронического уретрита, рецидивирующего цистита у женщин, уретральную лихорадку у мужчин, при наличии пузырно-мочеточникового рефлюкса — развитие восходящего пиелонефрита. Для профилактики развития осложнений необходимо строго соблюдать показания к выполнению ВИ, не нарушать методику, по показаниям проводить антибактериальную профилактику.

– Применяются ли ВИ у мужчин для лечения простатита, уретрита, цистита и т. д.? Какие осложнения у них могут возникнуть?

– ВИ используются используются в основном у женщин с воспалительными заболеваниями нижних мочевых путей.

– Есть ли патоморфологическое обоснование применения ВИ?

– Для решения вопроса о необходимости выполнения ВИ обязательным условием служит выполнение цистоскопии с биопсией, поскольку одной цистоскопии для принятия решения о выборе метода лечения недостаточно. Одним из морфологических обоснований для применения инстилляций является наличие плоскоклеточной метаплазии эпителия мочевого пузыря без ороговения с признаками хронического воспаления в подслизистом слое, что исключает истинную лейкоплакию, являющуюся «предраком», подтверждает наличие поствоспалительных изменений в мочевом пузыре. Существуют также морфологические признаки интерстициального цистита / синдрома болезненного мочевого пузыря, при котором также показаны ВИ.

– Какие препараты применяют с целью ВИ?

– Гепарин, диметилсульфоксид (ДМСО), диоксидин. При раке мочевого пузыря — противоопухолевые препараты, вакцина БЦЖ.

В настоящее время появились препараты гиалуроновой кислоты — например, Уро-гиал, который показал положительные результаты при лечении хронических циститов, в том числе интерстициальных.

– Надо ли выполнять цистоскопию и биопсию с целью подтверждения эффективности проведенного лечения?

– Для оценки эффективности ВИ необходимо, прежде всего, оценивать клиническую картину, анализировать динамику симптомов заболевания. Так как ВИ чаще всего используются в составе комбинированной терапии, вопрос о цистоскопии решается индивидуально.

– Как Вы относитесь к инстилляциям протарголом? Почему их нежелательно применять?

– К использованию протаргола я отношусь отрицательно. Проведены экспериментальные исследования, которые выявили развитие склеротических изменений в мочевом пузыре на фоне указанных ВИ.

Таким образом, можно определить следующие положения по ВИ:

1. Цель ВИ: восстановление муцинового слоя, регрессия плоскоклеточной метаплазии.
2. Показания: рецидивирующие инфекции нижних мочевых путей, поствоспалительные изменения в мочевом пузыре по типу лейкоплакии, интерстициальный цистит, рак мочевого пузыря.
3. Противопоказания: острые воспалительные заболевания мочевых путей, стриктуры уретры.
4. Осложнения ВИ: обострение хрони­ческих воспалительных процессов в мочеполовых путях (хронический уретрит, простатит, цистит), при наличии пузырно-мочеточникового рефлюкса — восходящий пиелонефрит.
5. Препараты для ВИ: Урогиал, гепарин, лидокаин, ДМСО, гидрокортизон.
6. Нельзя использовать протаргол!
7. Не применяют инстилляции для лечения простатитов, уретритов у мужчин!
8. Рекомендованная литература: О.Б. Лоран, А.В. Зайцев «Диагностика и лечение интерстициального цистита у женщин»;О.Б. Лоран, Л.А. Синякова, И.В. Косова «Рецидивирующие инфекции мочевых путей»

Беседовала В. Шадёркина, врач-уролог

Средняя оценка:

Ваша оценка: Нет Средняя оценка: 5 (2 голосов)

Техника Бодианского Протаргола | SpringerLink

Раздел

• 32
  Цитаты

• 154
  Загрузки

Часть
Серия Спрингера в экспериментальной энтомологии
серия книг (SSEXP)

Abstract

Методы, используемые в настоящее время для пропитки нервной ткани восстановленным серебром, в целом делятся на два класса: методы пропитки блоков и так называемые методы серебра на слайде.В более ранних процедурах пропитки блоков, таких как процедуры Гольджи, Кахала и Бельшовски, и их модификациях, целые кусочки ткани обрабатывались растворами серебра и только после этого делались срезы и устанавливались. В методах «серебро на слайде» материал сначала заделывают и нарезают, а затем окрашивают срезы после того, как они были помещены на предметные стекла. Методы блочной пропитки обсуждаются в другом месте этого тома (см. Главу 9) и не нуждаются в дополнительном рассмотрении здесь. Процедуры пропитки смонтированных секций, обычно из материала, залитого парафином, многочисленны, но их можно примерно подразделить в зависимости от типа соединения серебра, используемого в качестве пропитки.Обычно это либо неорганическая соль серебра, чаще всего нитрат серебра, либо комплекс серебро-белок, такой как протаргол.

Ключевые слова

Щавелевая кислота Нитрат серебра Сульфит натрия Высокая концентрация меди Концентрация сульфита

Эти ключевые слова были добавлены машиной, а не авторами. Это экспериментальный процесс, и ключевые слова могут обновляться по мере улучшения алгоритма обучения.

Это предварительный просмотр содержимого подписки,

войдите в

, чтобы проверить доступ.

Предварительный просмотр

Невозможно отобразить предварительный просмотр. Скачать превью PDF.

Информация об авторских правах

© Springer-Verlag New York Inc. 1980

Авторы и аффилированные лица

1. 1. Экспериментальная станция Ротамстеда, Харпенден, Англия

Цитоструктура после осаждения серебра Протарголом на JSTOR

Abstract

Модифицированный метод окрашивания протарголом серебра Бодиана был применен к перитриху Carchesium polypinum (Ciliata, Peritrichia, Peritrichida, Sessilina).Некоторые из этих образцов были исследованы непосредственно с помощью просвечивающей электронной микроскопии, чтобы определить селективность окрашивания протарголом. В этом методе тонировка золотом была обязательной для удовлетворительной подготовки. Осаждение красителей было высокоселективным с кинетосомами, ресничками, ядерным материалом и мионемами, имеющими определенное сродство. Стрии соматической клетки, появляющиеся под световой оптикой, были неокрашивающими эпиплазматическими пиками, в то время как альвеолы, окружающие эти пики, содержали инфундибулярную мионему.Инфундибулярное сетчатое волокно, внешние волокна в ножке и периферические области, окружающие пищевые вакуоли, имели сродство к протарголу на уровне разрешения электронного микроскопа, но не были видны в световой микроскоп. Также представлено обсуждение избирательности протаргола.

Информация для издателя

Wiley — глобальный поставщик решений для рабочих процессов с поддержкой контента в областях научных, технических, медицинских и научных исследований; профессиональное развитие; и образование.Наши основные направления деятельности выпускают научные, технические, медицинские и научные журналы, справочники, книги, услуги баз данных и рекламу; профессиональные книги, продукты по подписке, услуги по сертификации и обучению и онлайн-приложения; образовательный контент и услуги, включая интегрированные онлайн-ресурсы для преподавания и обучения для студентов и аспирантов, а также для учащихся на протяжении всей жизни. Основанная в 1807 году компания John Wiley & Sons, Inc. уже более 200 лет является ценным источником информации и понимания, помогая людям во всем мире удовлетворять свои потребности и воплощать в жизнь их чаяния.Wiley опубликовал работы более 450 лауреатов Нобелевской премии во всех категориях: литература, экономика, физиология и медицина, физика, химия и мир.

Wiley поддерживает партнерские отношения со многими ведущими мировыми обществами и ежегодно издает более 1500 рецензируемых журналов и более 1500 новых книг в печатном виде и в Интернете, а также базы данных, основные справочные материалы и лабораторные протоколы по предметам STMS. Благодаря расширению предложения открытого доступа Wiley стремится к максимально широкому распространению и доступу к публикуемому контенту и поддерживает все устойчивые модели доступа.Наша онлайн-платформа, Wiley Online Library (wileyonlinelibrary.com), является одной из самых обширных в мире междисциплинарных коллекций онлайн-ресурсов, охватывающих жизнь, здоровье, социальные и физические науки и гуманитарные науки.

Осведомленность о ЗППП: профилактика или наказание

До антибиотиков сифилис мог убить, а гонорея была причиной большинства случаев бесплодия. Обе болезни могут передаваться от мужа к жене к ребенку, потенциально разрушая семьи.Так что можно подумать, что прорывы в медицине в области профилактики и лечения будут приветствоваться с распростертыми объятиями.

Реальная история, как и люди, которые ее создали, намного сложнее.

---

Сострадание, а не страх и вина, должно руководить медицинской практикой.

---

Во время Первой мировой войны болезни, передаваемые половым путем, были огромной проблемой — уступая только пандемии гриппа 1918 года по количеству вызванных ими дней болезни (7 миллионов, если вы считаете). В бурные двадцатые годы произошла сексуальная революция, и к началу Второй мировой войны военные снова стали беспокоиться о потере рабочей силы из-за изнуряющих инфекций, которые уводили мужчин с линии фронта в лазареты.

Вооруженные силы сделали все возможное, чтобы подавить проституцию и отвлечь солдат от досуга. Но человеческое половое влечение невозможно было сдержать: подавляющее большинство американских солдат занимались сексом — даже примерно половина женатых солдат не были верны своим женам во время Второй мировой войны. Победа зависела от здоровья солдат, поэтому во время Первой и Второй мировых войн военные обеспечивали своих сексуально активных солдат «профилактикой», лечением, которое могло снизить риск венерических заболеваний — или венерических болезней, как тогда назывались заболевания, передаваемые половым путем.

Всем, кто думает, что презервативы доставляют хлопоты или что они «плохо себя чувствуют», должны прочитать описание историка медицины Аллана М. Брандта профилактической станции времен Первой мировой войны, которую солдатам было приказано посещать после полового контакта:

Солдат, явившийся на лечение, сначала помочился. Затем на специально сконструированном стуле он мыл свои гениталии водой с мылом, затем бихлоридом ртути, пока дежурный проводил осмотр. Затем помощник вводил раствор протаргола [протеината серебра] в пенис, который солдат удерживал в уретре в течение пяти минут, а затем изгонял.После инъекции мазь из каломели [хлорида ртути] втиралась в половой член, а затем его обматывали вощеной бумагой. Чтобы профилактика была эффективной, солдат не мог мочиться в течение четырех-пяти часов после лечения.

Высокий спрос на профилактику и материально-техническое обеспечение работы этих станций привели к разработке «прокитов» — средств профилактики, которые можно было вводить самостоятельно с помощью мази на основе ртути, карболовой кислоты и камфары. Во время Второй мировой войны презервативы также были широко доступны — на самом деле, военные не могли угнаться за спросом.

Забота о здоровье солдат не должна вызывать споров — но это было так. Даже когда на кону жизнь наших солдат, критики утверждали, что ВД следует контролировать, пропагандируя мораль, и что поощрение любых средств предотвращения, кроме безбрачия, является одобрением распущенности. Американская ассоциация социальной гигиены заявила, что профилактика, поощряя беспорядочные половые связи, на самом деле приведет к венерическим заболеваниям, а не менее, . Министр флота Джозефус Дэниелс считал, что профилактика «разрушит самые основы наших моральных и христианских убеждений.Другие опасались, что профилактика позволит людям избежать ответственности за свои действия — избежать заслуженного наказания.

В конце Второй мировой войны в медицине был сделан прорыв — пенициллин. Теперь от гонореи и сифилиса можно избавиться за несколько часов, используя лекарство с очень небольшим количеством побочных эффектов. Звучит как отличная новость, но не все это восприняли так. Доктор Джон Стоукс, ведущий «сифилограф» страны ( — это вакансия, о которой вы больше не слышите), обеспокоенный тем, что ликвидация венерического заболевания «повлечет за собой тяжелые потери в социальной, моральной и материальной жизни человека.Мир общепринятой, универсальной, гарантированной распущенности — это то, на что нужно внимательно посмотреть, прежде чем его примут ». Подобная критика перекликается с опасениями, высказанными в начале века, когда сальварсан был представлен как первое эффективное средство от сифилиса. Доктор Ховард Келли, например, сказал: «Я верю, что если бы мы могли в одно мгновение искоренить болезни, мы бы … полностью попали под власть животных страстей, став безнравственно и повсеместно безнравственно».

Кажется совершенно невероятным, что быстрое и легкое лекарство от двух разрушительных болезней — сифилиса и гонореи — будет осуждено как вершина скользкой дорожки, ведущей к повсеместному разврату.Но критики обеспокоены тем, что, когда убран страх перед последствиями, «сексуальная мораль» больше не может продвигаться как лучший способ защиты семьи, и в результате семейная ячейка будет ослаблена. Похоже, они действительно видели в болезни серебряную подкладку — как средство контроля над поведением и сексуальностью других людей.

Если бы вы могли вернуться в прошлое, что бы вы сказали этим людям?

Оказывается, вам не нужна машина времени, чтобы найти людей, которые считают, что профилактика ЗППП приносит больше вреда, чем пользы.Достаточно взглянуть на вакцину против ВПЧ, которая вызвала переполох среди более консервативных членов общества, когда она была представлена ​​в 2006 году. Они выразили опасения, что вакцинация против ВПЧ была равносильна «разрешению» заниматься сексом. Вызывает ужас, что для некоторых женская «сексуальная чистота» стоит больше, чем их жизнь: от рака шейки матки во всем мире ежегодно умирает 270 000 человек. (Исследования показали, что вакцинация не влияет на количество половых партнеров или возраст начала половой жизни.)

Еще одним источником противоречий является PrEP или «доконтактная профилактика», таблетки, которые защищают пользователей от заражения ВИЧ.Сама по себе PrEP примерно так же эффективна, как и презервативы, а в сочетании с презервативами снижает риск заражения еще более резко, обеспечивая 92-процентную защиту от ВИЧ в течение года. Некоторые, однако, обеспокоены тем, что, поскольку страх перед СПИДом не обсуждается, PrEP даст пользователям лицензию на «безответственность». (Эти опасения не подтверждаются исследованиями или клиническими испытаниями.)

Вера в то, что болезнь — это справедливое наказание за неправильное поведение и что профилактика позволяет нам избежать последствий наших действий, стара как мир.Это может быть выражено в религиозных терминах (СПИД как гнев Бога) или в светских терминах (люди с раком легких навлекли его на себя курением). Вы даже можете увидеть это в Конгрессе, например, когда член палаты представителей Мо Брукс утверждал, что люди без ранее существовавших условий «ведут хорошую жизнь» и «поступали правильно», имея в виду обратную сторону, которая заключается в том, что люди с уже существующими условиями не имеют .

Является ли страх перед раком, СПИДом и другими болезнями инструментом контроля над поведением других людей, навязывая единую идею морали? И если так, то разве способность контролировать других посредством этого страха важнее, чем облегчение страданий, вызываемых раком, СПИДом и другими болезнями? Действительно ли инструмент контроля над поведением более ценен для нас, чем инструменты облегчения страданий людей путем предотвращения или лечения болезней?

Важно, чтобы люди получали точную информацию, чтобы они могли принимать собственные решения о рисках — после этого людям нужно доверять управлять своим здоровьем так, как они считают нужным.Когда мы разделяем людей на «виновных» и «невиновных», мы стигматизируем больных и усугубляем их страдания. Когда мы обвиняем их в плохом здоровье, мы теряем из виду сострадание, которое должны испытывать друг к другу. И когда мы не помогаем «другим» быть здоровыми, мы все проигрываем, поскольку здоровое общество состоит из здоровых людей. Медицинской практикой должны руководствоваться ценности непредвзятости и сострадания, а не желание контролировать людей.

Воздержание — отличный способ избежать ЗППП, но он не универсален — он должен быть одним из многих.В те дни, когда еще не было презервативов, вакцин и лекарств, единственным вариантом, который у нас был, было воздержание, но давайте будем реалистами: на протяжении всей истории люди занимались сексом с несколькими партнерами, супруги не всегда были верны друг другу и — трагично — секс может быть принудительным или по принуждению. Чем больше расширяются наши возможности, тем больше у нас гибкости, чтобы найти стратегии предотвращения, которые будут работать в наших собственных уникальных ситуациях. Ожидать, что «мораль» станет нашим единственным путем к хорошему здоровью, и подавлять другие эффективные методы предотвращения — это, по сути, аморальность.

границ | Сезонность планктонных пресноводных инфузорий: коррелируют ли анализы, основанные на участках V9 гена 18S рРНК, с подсчетом морфоспидов?

Введение

В озерах умеренного пояса сезонные сукцессии фито- и метазоопланктона часто демонстрируют прогнозируемую динамику, которая была описана в концептуальной структуре, модели Plankton Ecology Group (PEG) (Sommer et al., 1986). За последние 30 лет экологические исследования расширили понимание механизмов, ответственных за сезонность, с ключевым выводом о том, что динамику гетеротрофных протистов следует рассматривать отдельно от структуры зоопланктона многоклеточных животных (Sommer et al., 2012). Микрозоопланктон может составлять основную долю от общего выпаса на фитопланктоне, потребляя более 50% первичной продукции в определенные периоды года (Weisse et al., 1990; Straile, 1998). Во фракции водорослевых протистов часто преобладают инфузории (Ciliophora), представляющие, например, первых и наиболее эффективных травоядных при весеннем цветении фитопланктона (Geller et al., 1991; Sommaruga and Psenner, 1993; Tirok and Gaedke, 2007; Posch et al. ., 2015). Однако способы питания инфузорий весьма разнообразны (бактериоядные, водоядные, всеядные, хищные), поэтому они составляют основную часть протистанского планктона в течение всего года (Mathes and Arndt, 1995; Straile, 1998).Инфузории могут даже быть доминирующими бактериоядными животными (Kisand, Zingel, 2000; Zingel et al., 2007) или потребителями автотрофного пикопланктона (Šimek et al., 1995) в некоторых озерах. Сезонные смены ассоциаций инфузорий и вовлеченных в них видов хорошо описаны для различных озер с умеренным климатом (Beaver, Crisman, 1989; Müller et al., 1991; Carrias et al., 1998; Sonntag et al., 2006; Zingel and Nõges, 2010). ; см. также обширный обзор литературы в Foissner et al., 1999). Эти исследования имеют одну общую черту — их результаты основаны на идентификации и количественной оценке морфологически четко определенных видов (morphospecies, Foissner et al., 1999) с помощью различных методов микроскопии. Подсчет морфологических видов позволяет количественно определять численность и биомассу на единицу объема воды, что является необходимым условием для изучения потоков энергии между трофическими объектами в озерах.

За 20 лет традиционные подходы, основанные на морфологии, были либо дополнены, либо даже заменены молекулярными методами в экологических исследованиях (Caron et al., 1999; Stoeck et al., 2006; Duff et al., 2008; Berdjeb et al., 2018). ). В настоящее время технологии высокопроизводительного секвенирования (HTS) произвели революцию в изучении сообществ протистанов в пресноводных экосистемах (Simon et al., 2015; Banerji et al., 2018; Bock et al., 2018; Михайлов и др., 2018). Среди прочего, HTS в окружающей среде дает возможность обнаружить загадочные и редкие виды, которые, скорее всего, не распознаются микроскопией (Amaral-Zettler et al., 2009; Nolte et al., 2010). Тем не менее, молекулярные методы анализа про- и эукариотических микробов должны иметь дело с множеством источников систематической ошибки. Прежде всего, ПЦР является основным источником ошибок из-за смещения праймеров и предпочтительной амплификации (Stoeck et al., 2006; Shakya et al., 2013; Трагин и др., 2018; Wear et al., 2018). Одной из основных проблем, возникающих из-за ПЦР и смещения праймеров, является критическое преобразование численности ампликонов в численность организма (Egge et al., 2013; Weber and Pawlowski, 2013; Stoeck et al., 2014), но решения см. Также Giner et al. (2016). К другим источникам ошибок относятся секвенирование (Huse et al., 2007), кластеризация ампликонов (Huse et al., 2010; Forster et al., 2016), а также неполнота и ошибки в справочных базах данных (Stoeck et al., 2014). Такие ошибки могут иметь обширные последствия для оценок разнообразия инфузорий, часто приводя к переоценке богатства операционных таксономических единиц (OTU) в окружающей среде.Кроме того, многие OTU все еще остаются неназначенными, а многочисленные морфоспецифические виды инфузорий еще не представлены в справочных базах данных (например, NCBI). Более того, высокое число копий генов 18S рРНК у инфузорий (Gong et al., 2013) и тот факт, что число копий сильно варьируется между видами, может сделать количественные результаты еще более ненадежными (Medinger et al., 2010). Таким образом, сомнительно, можно ли использовать только подходы HTS для ответа на экологические вопросы о видах инфузорий, таких как модели сукцессии и их значение для функционирования экосистемы.В нескольких исследованиях использовалось сочетание молекулярных и морфологических методов для изучения разнообразия и динамики сообществ планктонных инфузорий как из морских (Bachy et al., 2013, 2014; Santoferrara et al., 2014, 2016), так и из пресноводных систем ( Medinger et al., 2010; Luo et al., 2011; Stoeck et al., 2014). Одновременная идентификация морфовидов помимо секвенирования в окружающей среде помогает отличить значимые OTU от потенциальных ошибок секвенирования. Наконец, выделение и последующее секвенирование генов таксономических маркеров от идентифицированных видов инфузорий позволит нам связать данные секвенирования (OTU) с организмами и их известной аутэкологией.

В этом исследовании мы провели трехлетнюю кампанию по отбору проб в Цюрихском озере (отбор проб раз в две недели, n = 74), чтобы установить существенный набор данных для оценки и улучшения данных HTS, специфичных для инфузорий. Оба метода, классический подсчет морфовидов посредством количественной импрегнации серебром и секвенирование ампликона 18S рРНК, были использованы для исследования изменчивости комплекса инфузорий во времени. Чтобы проверить, совпадают ли два разных подхода друг с другом, мы сосредоточились на сезонных моделях двенадцати специфических морфовидов инфузорий.Эти виды были выделены непосредственно из воды озера, и большинство из них успешно культивировалось. Впоследствии их области V9 гена 18S рРНК были секвенированы и использованы в качестве семян для анализа HTS. Этот рабочий процесс привел к получению новой информации о последовательности для нескольких хорошо известных морфоспортов инфузорий, обитающих в пресноводных системах. Мы намеревались решить следующие задачи: (а) Коррелируют ли сезонные модели численности, а также редких и эфемерных видов инфузорий с помощью HTS с последовательностями, наблюдаемыми при подсчете морфоспецифических видов? (b) Позволяет ли HTS более точно описать сезонность редких и эфемерных видов инфузорий? (c) Есть ли связь между количеством считываний последовательностей и значениями клеточной численности или биомассы для видов инфузорий? (d) Отражает ли относительное количество считываний последовательностей количественную структуру сообщества, определенную с помощью подсчета морфовидов?

Материалы и методы

Место исследования, отбор проб и параметры окружающей среды

Цюрихское озеро (47 ° 19.3’N, 8 ° 33,9’E; Швейцария) — это предальпийское, олигомезотрофное и мономиктическое озеро, которое уже пять десятилетий является объектом интенсивных лимнологических исследований (Posch et al., 2012; Yankova et al., 2017). Основными морфометрическими дескрипторами являются: высота = 406 м над ур. М., Максимальная глубина = 136 м, средняя глубина = 51 м, площадь = 65,06 км, ² , объем = 3,3 км, ³ , и теоретическое время обновления воды = 1,2 года. Озеро служит резервуаром для питьевой воды более 1 миллиона человек. Пробы планктона отбирались каждые две недели с марта 2014 г. по 2017 г. ( n = 74 образца).Озерная вода была собрана с глубины 5 м с помощью пробоотборника Ruttner объемом 5 л. Объем воды в 5 л каждой пробы был разделен на 300 мл для метода подсчета морфологических видов и 4 л для HTS (см. Ниже), т. Е. Анализируемая вода поступала из одного и того же начального объема для обоих методов (см. Также схему рабочего процесса в Дополнительных документах). Рисунок S1). Кроме того, в течение всего периода отбора проб с верхних 20 м собирались уловы нетто (размер ячеи 10 мкм) для идентификации, выделения и культивирования живых особей.Сопутствующие абиотические параметры, то есть температура воды и концентрация кислорода, были измерены in situ для глубины отбора проб (5 м) с помощью многопараметрического зонда (6600 V2, Yellow Springs Instruments, США). Данные для описания трофического статуса, то есть концентрации общего фосфора (TP) и нитратов (NO ₃ -N), а также общей численности фитопланктона были получены от компании по водоснабжению Цюриха. Для подсчета бактерий 20 мл каждого 5 л образца консервировали формальдегидом (конечная концентрация 2%), окрашивали SYBR Green I (Sigma Aldrich) и оценивали с помощью проточной цитометрии (Cytoflex S, Beckman Coulter; Petrou and Nielsen, 2018).

Идентификация, численность и биомасса инфузорий

Определение живых инфузорий из уловов сети проводилось впоследствии после отбора проб в лаборатории с использованием микроскопа Zeiss Axio ImagerM1 (увеличение: от 100 × до 840 ×) и стереомикроскопа Zeiss Discovery.V8 (увеличение: от 10 × до 80 ×). Отдельные или множественные клетки идентифицированных инфузорий (таблица 1 и дополнительный рисунок S1) выделяли с помощью вытянутой стеклянной микропипетки и промывали 3-5 каплями стерильной фильтрованной озерной воды или среды (минеральная вода Volvic).Культуры поддерживали стерилизованными зернами пшеницы, поддерживающими рост бактерий для бактериоядных инфузорий, или штаммом Cryptomonas SAG 26.80 (Коллекция культур водорослей в Университете Геттингена, Германия), служащим источником пищи для водорослевых / всеядных видов. Культуры инфузорий хранили при 18 ° C и цикле 14 часов света (20 мкмоль м ^-2 с ^-1 ) / 8 часов темноты.

Таблица 1. Список из двенадцати видов инфузорий, которые были изолированы и частично культивированы в период исследования (март 2014–2017 гг.).

Для подсчета и расчета биомассы 300 мл озерной воды консервировали свежеприготовленным 15 мл раствора Буэна [содержащего 10,7 мл насыщенной пикриновой кислоты, 3,6 мл формальдегида (37% исходный раствор) и 0,7 мл ледяной уксусной кислоты; Скиббе, 1994]. Подвыборки (100–150 мл) фильтровали через фильтры из нитрата целлюлозы с диаметром пор 0,8 мкм, снабженные счетными сетками (Sartorius, Германия). Затем был применен метод количественного окрашивания протарголом (протеинатом серебра) (QPS) в соответствии с протоколом Skibbe (1994) с небольшими изменениями после Pfister et al.(1999). После процедуры окрашивания инфузории, пропитанные серебром, на фильтрах заливали канадским бальзамом (Merck, Германия), обеспечивая постоянные предметные стекла, сохраняющие свое качество в течение многих лет. Препараты анализировали при увеличении от 200 до 1600 с помощью микроскопа Zeiss Axio ImagerM1. Идентификацию живых и окрашенных видов инфузорий проводили согласно Foissner et al. (1991, 1992, 1994, 1995, 1999) и Sonntag et al. (2008). Мы следовали системам классификации Lynn (2008) и Gao et al.(2016) о таксономической принадлежности обнаруженных видов. Для каждого образца мы проверяли эквивалентную площадь фильтра до тех пор, пока не было определено и подсчитано не менее 400 клеток. Наконец, общая площадь фильтра была проверена на наличие редких видов, которые не были бы учтены нашей стандартной процедурой подсчета. Биомассу (т.е. сырой вес) для каждого идентифицированного вида инфузорий рассчитывали путем умножения численности инфузорий на видоспецифические коэффициенты пересчета, опубликованные Foissner et al. (1992, 1994, 1999). Эти опубликованные коэффициенты основаны на среднем размере клетки вида, геометрическом приближении формы клетки для расчета объема клетки и удельной плотности 1 пг мкм ^-3 (подробности см. В главе 2 в Foissner et al., 1992).

Секвенирование изолированных видов инфузорий

Частичные гены 18S рРНК, включая область V9, были секвенированы либо у культивируемых инфузорий, либо непосредственно у живых особей, собранных из уловов сети (таблица 1 и дополнительный рисунок S1). Клетки промывали, как описано выше, и голодали в течение ~ 24 часов в стерильной фильтрованной озерной воде или среде, чтобы гарантировать, что все потенциальные частицы пищи были переварены. Затем инфузории переносили в 1-2 мкл воды для ПЦР, которую затем использовали непосредственно в качестве матрицы для вложенной ПЦР с использованием праймеров от Marin et al.(2003; см. Дополнительный рисунок S2). В качестве альтернативы праймеры Euk360F (Edgcomb et al., 2011) и Univ1492RE (Stoeck et al., 2006) были использованы для нашего стандартного протокола ПЦР (дополнительный рисунок S2).

Условия вложенной ПЦР были следующими: первая денатурация при 96 ° C в течение 1 мин, затем 30 циклов, каждый из которых состоит из 1 мин при 96 ° C, 2 мин при 55 ° C, 3 мин при 72 ° C, а затем заключительное удлинение в течение 10 минут при 72 ° C с использованием смеси GoTaq ^® Green Master Mix (Promega). Эта процедура была успешно применена для вида Cinetochilum margaritaceum (таблица 1).Частичная 18S рДНК оставшихся одиннадцати видов была амплифицирована с использованием стандартного протокола ПЦР. Условия были следующими: первая денатурация при 94 ° C в течение 3 минут, затем 35 циклов, каждый из которых состоит из 1 минуты при 94 ° C, 1 минуты при 52 ° C и 2 минут при 72 ° C, с последующим окончательным удлинением. 5 мин при 72 ° C с использованием смеси GoTaq ^® Green Master Mix (Promega). Продукты ПЦР очищали с помощью набора для очистки Agencourt AMPure XP PCR Purification Kit (Beckman Coulter) и секвенировали по Сэнгеру с помощью химии ABI BigDye на генетическом анализаторе ABI 3130x (Applied Biosystems).В некоторых случаях использовались дополнительные праймеры для секвенирования E528F (Marin et al., 2003) и SR10f (Nakayama et al., 1998) для секвенирования всей области V9.

Экстракция, амплификация и секвенирование ДНК

Пробы сырой воды (2 × 2 л) предварительно фильтровали через сетку 150 мкм для удаления более крупного зоопланктона, а затем фильтровали через мембранный фильтр 0,65 мкм (Durapore, Millipore) с использованием перистальтического насоса с низкой скоростью потока 50 мл / мин. ^-1 . Фильтры (дубликаты) непосредственно переносили в криопробирку, содержащую 1.5 мл RNAlater (QIAGEN), помещают в холодильник (~ 5 ° C) на ночь и, наконец, хранят при -80 ° C до дальнейшей обработки. Для экстракции ДНК каждый фильтр переносили в пробирку с лизирующим матриксом (Lysing Matrix E, MP Biomedicals) и добавляли 600 мкл буфера RLT и 6 мкл β-меркаптоэтанола. Оставшуюся жидкость в каждой криопробирке центрифугировали и отбрасывали. К остаточному осадку добавляли 200 мкл буфера RLT и 2 мкл β-меркаптоэтанола и перемешивали. Эту смесь добавляли в пробирку с лизирующим матриксом. Для разрушения и удаления клеток из фильтра каждую пробирку с матрицей подвергали отбиванию шариками в течение 45 с с частотой 30 Гц.Затем общую ДНК окружающей среды экстрагировали с использованием мини-набора AllPrep DNA / RNA Mini Kit (QIAGEN).

Гипервариабельный участок V9 (длиной около 150 п.н.) 18S рДНК амплифицировали из экстрагированной ДНК в соответствии с протоколом Stoeck et al. (2010). Прямой праймер был 1391F (5′-GTACACACCGCCCGTC-3 ‘; относится к положению 1629–1644 в ссылке Saccharomyces cerevisiae с номером доступа U53879 в GenBank NCBI; Lane, 1991) и обратный праймер EukB (5′-TGATCCTTCTACCTACAGCAG 3 ′; относится к позиции 1774–1797 в S.cerevisiae ; Medlin et al., 1988). В протоколе ПЦР для амплификации V9 использовалась начальная стадия денатурации при 98 ° C в течение 30 с, затем 30 циклов по 10 с при 98 ° C, 20 с при 61 ° C, 25 с при 72 ° C и последние 5 мин. удлинение при 72 ° C. Реакции проводили в объемах 50 мкл, используя 0,5 мкл полимеразы Phusion (Biolabs), 10 мкл 5-кратного буфера Phusion GC (Biolabs), 1 мкл 10 мМ dNTP, 0,5 мкл ДНК-матрицы, 32,5 мкл чистой воды и 0,5 мкл вперед, и 0,5 мкл обратных праймеров. Успешную амплификацию проверяли электрофорезом в агарозном геле с использованием 1.0 г агарозы (Carl Roth GmbH), 100 мл буфера TAE (1 ×) и 5 ​​мкл бромистого этидия. Для каждого экстракта ДНК проводили трехкратные реакции ПЦР, чтобы минимизировать смещение ПЦР. Перед очисткой (набор Qiagen’s MinElute) были объединены реплики ПЦР, полученные из того же экстракта ДНК.

Из полученных продуктов ПЦР были сконструированы библиотеки секвенирования с использованием набора NEB Next ^® Ultra ^TM DNA Library Prep Kit для Illumina (NEB). Качество библиотек оценивали с помощью системы Agilent Bioanalyzer 2100.Восемнадцать образцов набора данных временных рядов (март 2014 г. — октябрь 2014 г.) были секвенированы на платформе Illumina NextSeq, сгенерировав считывания с парным концом 250 пар оснований. Все остальные образцы (ноябрь 2014 г. — март 2017 г.) секвенировали на платформе Illumina MiSeq, генерируя считывания парных концов длиной 300 пар оснований. Высокопроизводительное секвенирование было проведено компанией SeqIT GmbH & Co. KG (Кайзерслаутерн, Германия). Мы использовали по крайней мере 250 bp-чтений NextSeq, чтобы гарантировать максимально возможное качество последовательности (100% перекрытие последовательностей чтения 1 и чтения 2; обратите внимание: последовательности превышали длину 150 bp из-за мультиплексирования и адаптеров).

Предварительная и постобработка данных высокопроизводительного секвенирования

Парные чтения были объединены с помощью специального сценария. Качество данных HTS оценивалось следующим образом: на начальном этапе чрезмерные выступы праймеров были обрезаны с помощью CUTADAPT версии 1.18 (Martin, 2011). Затем чтение было отфильтровано по качеству с помощью команды split.libraries.py в QIIME версии 1.8.0 (Caporaso et al., 2010). Сохранялись только такие считывания, которые имели точно совпадающие штрих-коды и праймеры, содержали исключительно однозначные нуклеотиды и имели минимальную длину 90 пар оснований.На заключительном этапе качественной фильтрации все чтения подверглись химерному анализу de novo в UCHIME v5.2.236 (Edgar et al., 2011).

Все высококачественные чтения были в конечном итоге реплицированы в ампликоны и сгруппированы в SWARM версии 2.2.2 (Mahé et al., 2015) с использованием d = 1. Это значение d относится к локальному порогу кластеризации вместо произвольный глобальный порог кластеризации. Кроме того, SWARM не зависит от порядка ввода. OTU растут итеративно, сравнивая каждое поколение назначенных ампликонов с оставшимися чтениями в наборе данных.OTU закрывается, когда OTU не может быть назначен новый ампликон с разницей d или меньше. С помощью специального сценария была создана таблица непредвиденных обстоятельств OTU на основе выходных файлов SWARM (сценарий можно получить напрямую по запросу от Доминика Форстера, Университет Кайзерслаутерна).

Отнесение данных HTS к культивируемым видам инфузорий

Перед сравнением данных HTS с данными о последовательностях культивируемых видов инфузорий, таблица сопряженности OTU была нормализована до наименьшего числа последовательностей во всех образцах (110 100 последовательностей в образце 31 марта 2014 г.).Нормализация была выполнена в R версии 3.5.1 (R Development Core Team, 2008) с помощью команды rrarefy в пакете vegan . Из каждой OTU мы извлекли начальную последовательность как репрезентативную. Затем представители набора данных HTS сравнивали с последовательностями, полученными от двенадцати выбранных видов инфузорий с использованием blastn в BLAST версии 2.6.0 (Altschul et al., 1990). Последовательности HTS должны были иметь общий фрагмент из не менее 90 последовательных нуклеотидов и сходство 97%, чтобы быть отнесенными к одной из этих двенадцати культивируемых инфузорий.Только те OTU, репрезентативные последовательности которых совпадают с нашими двенадцатью отобранными инфузориями (таблица 1), были извлечены из нормализованной таблицы сопряженности для дальнейшего анализа.

Статистический анализ: сравнение молекулярных и морфологических данных

Чтобы проверить, сходны ли модели сукцессии подсчета морфологических видов с данными HTS, для каждого из двенадцати исследованных видов инфузорий был рассчитан коэффициент ранговой корреляции Спирмена. Поскольку мы выполнили несколько корреляционных тестов на одном и том же наборе данных, была применена поправка Бонферрони для защиты от инфляции альфа-уровня.Кроме того, подсчет клеток, значения биомассы и количество считываний последовательностей на дату отбора проб были использованы для составления трех матриц несходства (Брей Кертис) — по одной для каждого измерения. Корреляцию последовательности с количеством клеток или матрицей биомассы проверяли с помощью простого теста Мантеля с 10 000 перестановок. Все статистические анализы были выполнены с использованием R версии 3.4.4 (R Development Core Team, 2008).

Результаты

Сезонность скопления инфузорий с особым вниманием к двенадцати избранным видам

Цюрихское озеро является мономиктичным, и оборот воды обычно происходит ранней весной, т.е.е., с февраля по апрель. Параметры окружающей среды имели типичную сезонную закономерность, т.е. в период исследований не было экстремальных климатических лет (рисунок 1). Температура воды на глубине отбора проб (5 м) достигала минимум 4,7 ° C зимой и максимум 23,7 ° C летом. Максимальные концентрации кислорода были измерены во время весеннего цветения фитопланктона (апрель – май). К концу года концентрация кислорода немного снизилась, однако значения на глубине 5 м все еще были выше 8.7 мг. Л ^-1 (насыщение> 70%) даже зимой. Концентрации общего фосфора и нитратов (NO ₃ -N) снизились из-за поглощения автотрофами к концу года и увеличились в результате круговорота воды ранней весной. Максимальная численность фитопланктона была достигнута в летние месяцы, тогда как общая численность гетеротрофных бактерий увеличивалась весной и оставалась на высоком уровне (примерно 4 × 10 ⁹ бактерий L ^-1 ) до осени. Общая численность инфузорий следовала типичному повторяющемуся годовому графику со слегка выраженными пиками в весеннее время и максимальными значениями (ок.60 × 10 ³ клеток L ^-1 ) летом при самых высоких температурах воды (рисунок 1). В течение 3 лет исследований мы выявили 48 различных морфотипов инфузорий на основании микроскопических подсчетов, и 31 из этих морфотипов можно было четко отнести к уровню морфотипов (дополнительная таблица S1). Семнадцать морфотипов были отнесены только к уровню рода, частично (i) представляющие еще неописанные виды и (ii) морфотипы, которые не могли быть связаны с известными видами из-за методологических ограничений при оценке препаратов QPS.

Рис. 1. Экологические данные и общая численность инфузорий Цюрихского озера, определенные для 5-метрового слоя с марта 2014 по 2017 гг. (Отбор проб раз в две недели, n = 74). (A) Температура воды (° C) и концентрация кислорода (мг л ^-1 ). (B) Концентрации общего фосфора (мкг л ^-1 ) и нитрата NO ₃ -N (мкг л ^-1 ). (C) Общая численность фитопланктона (10 ⁶ клеток L ^-1 ) и общая численность гетеротрофных бактерий (10 ⁹ бактерий L ^-1 ). (D) Общая численность инфузорий (10 ³ инфузорий L ^-1 ), определенная подсчетом морфовидов у образцов, пропитанных протарголом.

С помощью нашего рабочего процесса выделения и культивирования (дополнительный рисунок S1) мы определили конкретные последовательности (включая области V9 гена 18S рРНК) для двенадцати видов инфузорий, отнесенных к пяти классам из озера Цюрих, которые были использованы в качестве семян для анализа HTS (Таблица 1, инвентарные номера: LR025746, LS999896, LS999898-LS999904, LS999906-LS999908).Пять из этих видов еще не были представлены в публичных генетических базах данных. Некоторые очень распространенные и очень часто встречающиеся виды могут быть охарактеризованы подсчетом морфовидов, а также HTS (рис. 2). Сравнение обоих методологических подходов привело к следующим результатам: (i) Сезонные сукцессии для наиболее распространенных морфоспортов, основанные на подсчетах, показали замечательную корреляцию с данными HTS (см. Семь верхних панелей на Рисунке 2, Таблице 2 и Дополнительном Рисунке S3). Даже для видов с резкими колебаниями численности, например.g., Cinetochilum margaritaceum, Histiobalantium bodamicum , Pelagostrombidium mirabile , миксотрофный Coleps sp. и Rimostrombidium lacustris , оба метода дали очень сопоставимую временную динамику. Однако корреляция считываний, специфичных для Balanion planctonicum , с количеством клеток была довольно низкой (см. Обсуждение возможных причин). Умеренная корреляция между двумя методами наблюдалась для второго по численности вида Halteria bifurcata .Подсчет Halteria , вероятно, включал два едва различимых вида, а именно H. bifurcata и H. grandinella , что привело к потенциальным ошибкам при подсчете морфоспецифических видов. Тем не менее, были статистически значимые положительные корреляции (порядок рангов Спирмена) между микроскопическими подсчетами и данными HTS для одиннадцати из двенадцати отобранных инфузорий, но высокие коэффициенты> 0,6 были определены только для пяти видов (таблица 2). Для восьми видов значимые корреляции были обнаружены для всего набора данных за 3 года, но не в пределах каждого года (Таблица 2).(ii) Расхождение между подсчетом HTS и морфосвидов было замечено для эфемерных и редких видов на основании морфологических исследований (например, Uroleptus willii , Stokesia vernalis ). В данном случае HTS казались более точным методом описания сезонности, чем классический подход (рисунки 2, 3 и дополнительный рисунок S3). Например, HTS продемонстрировал ежегодный внешний вид Codonella cratera и Pelagodileptus trachelioides за все 3 года исследования, хотя с помощью микроскопии эти виды можно было обнаружить только через 2 из 3 лет.Наибольшее расхождение между обоими методами наблюдалось для Stentor roeselii . Мы обнаружили этот вид микроскопически только через 1 год (то есть на одном из 74 проанализированных слайдов, пропитанных протарголом), тогда как считывания ампликонов продемонстрировали появление на всех трехлетних исследованиях (рис. 2).

2 n = 74 для каждого вида и применяемого метода; глубина отбора проб = 5 м).Порядок видов отражает их среднюю численность на основе подсчета, при этом наиболее многочисленные виды находятся наверху, а самые редкие представители — внизу. Наброски морфовидов инфузорий являются оригинальными рисунками Джанны Питч. Масштабные линейки: 40 мкм.

Таблица 2. Анализ корреляции рангового порядка Спирмена для двенадцати отобранных видов инфузорий по сравнению с количеством прочтений для их конкретных последовательностей V9.

Рис. 3. Обнаружение двенадцати отобранных видов во всех проанализированных образцах (100% = 74 образца) путем подсчета морфотипов и HTS.Соотношение числа считываний и числа появлений указано в таблице над панелью. Из-за ограничений, связанных с конкретным методом, общий объем исследуемой пробы при микроскопическом подходе составлял не более 150 мл. Данные HTS основаны на 4 л отфильтрованного объема пробы.

В целом, HTS показал более высокий процент встречаемости для всех, кроме одного вида инфузорий ( B. planctonicum ), чем при микроскопическом подсчете (рис. 3). Различия между двумя методами были разительны для некоторых инфузорий, например.g., специфические чтения для R. lacustris были зарегистрированы для всех исследованных образцов ( n = 74), но мы обнаружили этот вид только в 50% исследованных препаратов QPS. Основываясь на подсчете клеток, мы бы определили S. vernalis и C. cratera как действительно эфемерные виды, однако данные HTS показали их появление в 80 и 77% образцов соответственно (рис. 3).

Значения численности и биомассы в зависимости от числа считываний последовательности

Сначала мы определили порядок ранжирования семи наиболее распространенных видов на основе количества и определили, отражаются ли эти классификации также в биомассах и количестве считываний видоспецифичных последовательностей (Рисунок 4).Соответствие между числом считываний последовательностей и биомассой было заметно выше, чем между числом считываний последовательностей и численностью морфоспортов. Однако для некоторых видов мы обнаружили поразительную недооценку или переоценку их количественного значения в сообществе инфузорий с помощью HTS. Например, подсчеты идентифицировали небольшую B. planctonicum (∼20 × 15 мкм) как численно доминирующий вид на протяжении всего периода исследования, в то время как количество считываний последовательностей для этого конкретного таксона было низким по сравнению со всеми другими изученными инфузориями (рис. Дополнительная таблица S2).Противоположное соотношение было обнаружено, например, для более крупного вида R. lacustris (120 × 70 мкм), который характеризовался большим количеством считываний последовательностей, но низкой численностью подсчитанных особей (рисунки 2, 4 и дополнительная таблица S2). На протяжении всего исследования наибольшее количество считываний последовательностей было получено для H. bodamicum , вида, который также достиг высоких значений общей биомассы (рис. 4).

Рис. 4. Порядок ранжирования семи наиболее массовых видов инфузорий на основе численности по сравнению с их биомассой и количества видоспецифичных прочтений (HTS) за 3 года исследования ( n = 74 для каждого вида).Порядок ранжирования для конкретных методов указан в таблице над панелью. Столбцы показывают 25-й, 50-й и 75-й процентили, линии на каждом столбце показывают медианы, усы обозначают 10-й и 90-й процентили, а точки указывают 5-й и 95-й процентили. Белые линии в столбцах — средние значения.

Для окончательного обзора мы сравнили отношения двенадцати выбранных видов друг к другу по отношению к численности, биомассе и количеству считываний последовательностей за весь период исследования (Рисунок 5).Из-за различий в средних размерах клеток этих видов вклад в биомассу отличался от их доли в численности клеток. Например, B. planctonicum составлял 38% от совокупной численности двенадцати выбранных видов, но составлял только 11% кумулятивной биомассы и 0,5% считываний последовательностей, соответственно. Противоположная картина наблюдалась, например, для R. lacustris с вкладом 0,9, 7 и 19% в совокупную численность, биомассу и значения чтения соответственно.Таким образом, отношения видоспецифичных считываний друг к другу лучше отражают состав сообщества на основе определения биомассы (рис. 5). Эта тенденция была подтверждена при сравнении расстояний Брея Кертиса между каждой парой образцов ( n = 74) с использованием подсчета клеток, биомассы и количества считываний последовательностей для каждого вида. Тест Мантела показал более сильную корреляцию между расстояниями, основанными на количестве считываний последовательностей и биомассе на вид ( r = 0,425, p <0.001), а не на основе количества считываний последовательностей и количества клеток на вид ( r = 0,231, p <0,001).

Рис. 5. Отношение двенадцати выбранных видов друг к другу по отношению к численности (слева), биомассе (в центре) и количеству считываний (справа) за весь период исследования (в среднем 74 образца для каждого вида и примененных метод).

Обсуждение

Сильные стороны и ограничения количественной оценки на основе морфологических видов

С тех пор, как впервые была формализована концепция микробной петли и ее значение для динамики пищевой сети (Azam et al., 1983), исследованиям роли инфузорий как внутренних компонентов морских и пресноводных пелагических систем уделяется значительное внимание. Сегодня мы можем извлечь пользу из «продолжительной» истории исследований в области анализа морфотипов инфузорий, уделяя особое внимание планктону. С 1990-х гг. Новые методологические подходы (Montagnes, Lynn, 1987; Skibbe, 1994) и отличные таксономические компиляции (Foissner, Berger, 1996; Foissner et al., 1999) позволили детально описать сукцессии комплексов инфузорий.Таким образом, сезонные модели некоторых ключевых планктонных видов хорошо описаны, включая данные о факторах окружающей среды (например, источниках пищи, температурных эффектах, нисходящем давлении выпаса скота), которые вызывают сукцессии инфузорий (см. Foissner et al., 1999; и ссылки в нем. ). Следовательно, для любого исследования планктонных инфузорий правильная идентификация морфовидов является предпосылкой для использования этих глубоких знаний. Здесь количественное окрашивание протарголом (QPS) оказалось предпочтительным инструментом для количественной оценки инфузорий в сочетании с относительно высоким таксономическим разрешением (Montagnes and Lynn, 1987; Jerome et al., 1993; Скиббе, 1994).

Благодаря нашему многолетнему опыту работы с этим методом (Pfister et al., 1999), мы можем определить его плюсы, а также недостатки и ограничения: (i) Консервированные и окрашенные образцы концентрируются на фильтрах и заделываются в слой Сначала агар, а в конце концов — канадский бальзам, препараты имеют определенную толщину, что может отрицательно повлиять на оптическую оценку во время светлопольной микроскопии. Это особенно проблематично для идентификации очень крошечных видов, где незначительные различия, например.g., в их оральном или соматическом цилиарном паттерне. Например, трудно различить мелкие морфовиды в пределах родов Urotricha и Cyclidium на слайдах QPS (дополнительная таблица S1). Таким образом, неколичественные методы импрегнации серебром необходимы дополнительно для точной идентификации видов (Foissner, 2014). (ii) Вся рабочая процедура QPS является трудоемким методом, и обычно для окрашивания 8 образцов требуется 5 часов, а для оценки одного препарата обычно требуется несколько часов.Как следствие, у нас есть ограничения в кампаниях по отбору проб, которые нацелены на высокое пространственное и временное разрешение динамики скоплений инфузорий. (iii) Все методы количественного определения планктонных инфузорий позволяют анализировать только ограниченный объем воды. Например, мы могли бы сконцентрировать максимум 150 мл на образец, чтобы получить хорошие препараты для олигомезотрофного озера Цюрих.

Два последних недостатка (ограничения на анализируемые образцы и объемы воды), по-видимому, затрудняют анализ эфемерных и редких видов с одной стороны, но также затрудняют описание динамики численности массовых и быстрорастущих представителей, с другой стороны.В более раннем исследовании динамики весеннего цветения в озере Цюрих мы обнаружили с помощью высокой частоты отбора проб (интервалы отбора проб 2–4 дня), что весенние пики численности многих видов продолжались всего несколько дней (Posch et al., 2015). Такая быстрая динамика популяции наблюдалась в нескольких озерах (например, Müller et al., 1991; Šimek et al., 2014) и была связана с высокими темпами роста инфузорий, приводящими к временам удвоения на 1-2 дня (Müller and Geller, 1993 ; Macek et al., 1996). Следовательно, определенно необходимо исследовать большие объемы образцов с высоким временным разрешением (например,г., ежедневно в теплое время года) для выяснения динамики сообществ планктонных инфузорий. Здесь HTS, по-видимому, является многообещающим дополнительным подходом к методам, основанным на морфологических видах.

Выбор региона V9 в качестве маркера

Различные гипервариабельные области использовались для мониторинга сообществ эукариотического планктона в предыдущих исследованиях, и их полезность обсуждалась исследователями. Для обзора и сравнения мы ссылаемся на Tanabe et al. (2016). Среди трех наиболее популярных маркерных областей (V1 – V2, V4 и V9) мы выбрали область V9 по следующим причинам: (i) Хотя универсальность праймеров очень похожа для всех трех конкретных стандартных наборов праймеров, в настоящее время область V9 это лучший компромисс между охватом базы данных и таксономическим разрешением (изменчивость последовательностей; Tanabe et al., 2016). (ii) Кроме того, эта область заметно короче, чем области V1 – V2 и V4, и, таким образом, позволяет получить гораздо большую глубину последовательности при меньших затратах, что особенно актуально в исследованиях с большим количеством образцов. (iii) Наконец, в крупнейшем на сегодняшний день исследовании экологического секвенирования сообществ эукариотического планктона (De Vargas et al., 2015) использовалась область V9, что позволило получить хороший охват большинства (если не всех) основных таксономических линий эукариот. Будущие исследования метаданных экологических последовательностей эукариотического планктона выиграют от исследований, в которых уже использовался этот генетический маркер.

Корреляция данных HTS с подсчетом морфотипов

Преобразование численности ампликонов в наборах данных HTS в численность клеток — критическая проблема в молекулярной экологии и экологическом секвенировании. В более ранних исследованиях сообществ макетов протистана, в то время как все виды были обнаружены после секвенирования HTS, относительная доля типов последовательностей не коррелировала с численностью клеток в смесях клеток (Egge et al., 2013; Weber and Pawlowski, 2013). Кроме того, сравнительные исследования в природных экосистемах показали, что численность последовательностей и численность клеток часто несовместимы (Bachy et al., 2013; Сантоферрара и др., 2014; Stoeck et al., 2014). Однако эти исследования не являются окончательными, поскольку другие исследования поддерживают количественное использование данных HTS. Giner et al. (2016) сообщили об адекватных корреляциях между микроскопическими числами планктонных пикоэукариот и молекулярными сигналами после HTS. Это подтверждается более поздними исследованиями Forster et al. (2018) и Stoeck et al. (2018), показав, что анализ ассоциаций, основанный на данных обилия HTS инфузорий, отражает закономерности, полученные в результате морфологических исследований тех же образцов.Giner et al. (2016) утверждали, что ошибки ПЦР (Stoeck et al., 2006; Shakya et al., 2013; Tragin et al., 2018) и предполагаемые артефакты секвенирования (Huse et al., 2007) не влияют на корреляцию между относительным считыванием и изобилие клеток. Авторы продемонстрировали, что чем больше чтения, тем выше доля ячеек. По мнению этих авторов, использование относительного количества читателей в качестве показателя состава сообщества для целей сравнения оправдано. Противоречивые результаты упомянутых исследований демонстрируют, что относительная численность данных HTS может быть интерпретирована количественно, но также предупреждает о рассмотрении в качестве прямых заменителей численности клеток в естественных сообществах.Обстоятельства, при которых количественный анализ и интерпретация данных HTS возможны и надежны, еще предстоит определить.

В нашем исследовании оба метода показали четкую сезонную сукцессию для всех выбранных видов, а динамика популяций, основанная на HTS, в большинстве случаев заметно коррелировала с данными морфоспортов (рисунок 2 и дополнительный рисунок S3). До сих пор было всего несколько попыток сравнить временные наборы данных HTS с микроскопическим анализом пресноводных систем. Medinger et al.(2010) обнаружили значительную корреляцию между численностью клеток и данными о последовательности только для двух из пяти исследованных видов протистанов. Stoeck et al. (2014) провели исследование сообщества инфузорий из олигомезотрофного озера с помощью микроскопии и пиросеквенирования области V4 гена 18S рРНК. В последнем исследовании данные секвенирования вообще не отражали численность морфовидов. Одной из основных причин этого несоответствия была неадекватность базы данных референсных генов с чрезвычайно низким охватом типичных пресноводных инфузорий.Авторы уже заявили, что дальнейшие инициативы по штрих-кодированию для пресноводных инфузорий (не только сосредоточенные на области V4) были срочно необходимы для полного использования потенциала HTS в экологических исследованиях пресноводных простейших. Кроме того, более глубокая стратегия секвенирования, достижимая с помощью пиросеквенирования, будет полезна для полного охвата разнообразия протистанского планктона в пресноводных средах (Stoeck et al., 2014).

Как показало наше исследование, динамика сукцессии инфузорий, основанная на численности прочитанных, была очень похожа на закономерности, выведенные из подсчета морфо-видов.Двумя шагами к лучшему согласованию паттернов, полученных с помощью микроскопии и секвенирования, являются (i) более глубокий охват последовательностей с помощью технологии секвенирования Illumina и (ii) доступность референсных последовательностей инфузорий, полученных от местных представителей сообщества. Таким образом, HTS действительно помогли пролить свет на динамику популяций эфемерных и редких видов (рис. 2). Преимущество HTS перед микроскопией в этом контексте, безусловно, заключалось в возможности скрининга более высоких объемов образцов (HTS: 4 л, морфоспецифический анализ: макс.150 мл), что является необходимым условием для ответа на этот вопрос (Dolan and Stoeck, 2011). Поскольку в определенные периоды года редкие виды могут упасть ниже предела микроскопического обнаружения, считывания ампликонов все равно будут обнаруживаться HTS. И наоборот, секвенирование не позволяет различить клетки, проявляющиеся как активные трофозоиты или как покоящиеся цисты в пелагиали. Таким образом, популяционная динамика эфемерных и редких видов инфузорий остается предметом дальнейших исследований.

Balanion planctonicum представлял собой единственный вид, который был обнаружен в большем количестве образцов с помощью микроскопии, чем с помощью HTS (рис. 2, 3).Для интерпретации данных HTS мы могли использовать только одну эталонную последовательность, полученную из клонального штамма B. planctonicum (таблица 1). Однако этот морфовид может представлять собой комплекс видов, укрывающий криптические таксоны, которые не были бы обнаружены с помощью нашего рабочего процесса, и в будущем потребуется секвенирование большего количества клональных культур. Следующее наблюдение подтверждает наш тезис: установив порог идентичности 99% по сравнению с примененными 97%, мы получили очень похожее количество конкретных считываний для всех видов, за исключением B.planctonicum , который не может быть обнаружен с использованием более высокого порогового уровня (дополнительная таблица S2). Кроме того, наибольшее расхождение между морфологическими подсчетами и численностью считывания ампликонов наблюдалось в летние месяцы, когда общая численность инфузорий достигала максимальных значений. Поскольку количество считываний, специфичных для B. planctonicum , было per se маргинальным, сигналы ампликона, вероятно, терялись по сравнению с большим количеством считываний всех других инфузорий из-за процедур нормализации анализа HTS.

Взаимосвязь между числами считываний и значениями численности или биомассы

Мы проверили, отражают ли отношения прочтений между двенадцатью выбранными видами состав сообщества, выведенный из подсчета клеток (рис. 5). Можно ожидать расхождения между этими двумя методами (Santoferrara et al., 2014; Stoeck et al., 2014), поскольку, вероятно, все виды инфузорий имеют чрезвычайно высокое число копий оперона рДНК на индивидуальную клетку. Например, Gong et al. (2013) сообщили о величине ∼316000 (± 7100 стандартного отклонения) копий на клетку для перитрихозных инфузорий ( Vorticella sp.). Авторы также задокументировали, что количество копий рДНК на клетку заметно различается между (от 3385 до 315 786) и даже внутри 14 исследованных изолятов. Последнее изменение может быть связано с образованием или распадом макронуклеаров во время различных фаз роста и половой жизни клетки. В нашем исследовании видоспецифические вариации числа копий оперона рДНК могут быть причиной того, что некоторые, даже многочисленные, виды (например, B. planctonicum и C. margaritaceum ) характеризовались низким числом считываний.Напротив, чтения H. bodamicum достигли наивысших значений на протяжении всего исследования, хотя и не были самым многочисленным видом. Систематическое недопредставление видоспецифичных считываний также может быть вызвано паттернами амплификации, специфичными для праймеров. Однако относительно высокая конгруэнтность составов ассоциаций, основанная на биомассах и количестве прочтений (рис. 5), скорее говорит о связи между размером клеток вида и числом копий рДНК. Такая связь ранее была показана для 18 штаммов водорослей, представляющих несколько классов эукариот (Zhu et al., 2005). Fu and Gong (2017) опубликовали единственное исследование, в котором изучалась связь между рДНК и количеством копий рРНК и фенотипическими признаками у инфузорий. Взаимосвязь между рДНК или рРНК и размером (объемом) клеток изучаемых инфузорий (масштабирование риботипа) согласуется как с метаболической теорией экологии, так и с гипотезой скорости роста, давая количественную основу для связи числа копий клеточной рРНК с размером клетки, ростом (активность) и стехиометрия биомассы. Эти результаты могут объяснить наблюдаемое соответствие между изобилием генов таксономических маркеров и клеточной биомассой в природных сообществах инфузорий.

Необходимость метабаркодирования планктонных пресноводных инфузорий

В этом методологическом исследовании мы не сосредотачивались на очевидных сильных сторонах HTS для анализа планктонных инфузорий, то есть (i) для выяснения бета-разнообразия в течение сезонного цикла, (ii) для получения указаний на загадочные, тесно связанные виды, и (iii) обнаружить, вероятно, еще неизвестные и неописанные виды (Santoferrara et al., 2016). Нашей целью было сравнить данные HTS с подсчетом морфотипов в отношении сезонности как многочисленных, так и редких видов.Мы знали, что информация о последовательностях (18S рДНК) для большинства известных морфотипов в озере Цюрих (Posch et al., 2015) не существовала в начале нашего исследования. Наш выбор двенадцати видов, которые были изучены более подробно, частично зависел от успешной изоляции и культивирования образцов. Основываясь на подсчете морфологических видов, мы обнаружили, что несколько видов в пределах рода Urotricha (Foissner and Pfister, 1997) были так же многочисленны, как B. planctonicum за 3 года исследований (дополнительная таблица S1).Однако нам не удалось выделить и секвенировать Urotricha spp., И, к сожалению, в общедоступной базе данных последовательностей нет ни одной записи, касающейся области V9 этого рода. Таким образом, мы не смогли извлечь Urotricha специфических прочтений из наших данных HTS, что свидетельствует о необходимости дальнейшего штрих-кодирования ДНК морфологически хорошо описанных планктонных пресноводных инфузорий. Основываясь на обширном обзоре литературы, Foissner et al. (1999) предположили, что около 180 описанных морфологических видов действительно могут быть эупланктонными, и что общее количество планктонных видов в одном озере (альфа-разнообразие) может варьироваться от 50 до 100 (см. Также Sonntag et al., 2006; Зингель и Ныгес, 2010). Для озера Цюрих мы обнаружили 48 различных морфотипов инфузорий на основе микроскопических подсчетов для эпипелагической области в течение 3 лет исследований. Это число кажется довольно низким по сравнению с ожидаемым и частично описанным разнообразием почв или проточных вод (см. Таблицу 3.7 в Foissner et al., 1999). Однако инфузории в пелагических царствах нуждаются в особых адаптациях к планктонной жизни и уникальных стратегиях, чтобы встречаться с достаточным количеством частиц пищи в окружающей среде, часто бедной питательными веществами.Принимая эти числа как приближение к разнообразию планктонных инфузорий, инициативы по штрих-кодированию ДНК возможны даже тогда, когда можно ожидать загадочных или все еще неописанных таксонов. Тем не менее, это остается сложной задачей, поскольку многие виды инфузорий демонстрируют очень выраженные сезонные изменения с отчетливыми максимумами популяции, длящимися всего несколько дней или недель и редко встречающимися большую часть года.

Наконец, оценка HTS зависит от обширной базы данных эталонных последовательностей. Связывая OTU с известными морфовидами, мы можем использовать обширные знания об аутэкологии этих видов.Этот аспект имеет решающее значение для науки и особенно для прикладных исследований, основанных на идентификации видов-индикаторов.

Авторские взносы

TP, TS, BS и GP разработали и разработали исследование. GP и EB провели подсчет морфологических видов и секвенирование изолированных / культивируемых видов. TS, ZQ и DF провели и оценили анализ HTS. Все авторы обсудили результаты и внесли свой вклад в концепцию рукописи. GP и TP написали рукопись и создали все рисунки и таблицы.

Финансирование

Это исследование финансировалось Швейцарским национальным научным фондом (SNF, проект: 31003A-182489 и 310030E-160603/1), Немецким исследовательским фондом (DFG, проект: STO 414 / 13-1), Австрийским научным фондом (FWF). , Project: I2238-B25) и исследовательский грант Фонда Карла Цейса для DF.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарим Томаса Прёшольда за разработку стратегии вложенной ПЦР для области V9. Мы также благодарим Себастьяна Диррена, Дебору Кнапп, Ойгена Лоэра, Дэниела Марти и Катю Пушкареву за их помощь в отборе проб и лабораторных работах. Мы также благодарны Барбаре Каммерландер, Микаэле Сальчер, Эдварду Митчеллу и Стефану Андрею за их критические комментарии к рукописи.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https: // www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2019.00248/full#supplementary-material

Сноски

1. https://cran.ism.ac.jp/web/packages/vegan/vegan.pdf

Список литературы

Альтшул, С. Ф., Гиш, В., Миллер, В., Майерс, Э. У. и Липман, Д. Дж. (1990). Базовый инструмент поиска локального выравнивания. J. Mol. Биол. 215, 403–410. DOI: 10.1016 / S0022-2836 (05) 80360-2

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Амарал-Цеттлер, Л.А., Макклимент, Э. А., Даклоу, Х. У., и Хьюз, С. М. (2009). Метод изучения разнообразия протистанов с использованием массового параллельного секвенирования гипервариабельных участков V9 малых субъединичных генов рибосомной РНК. PLoS One 4: e6372. DOI: 10.1371 / journal.pone.0006372

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Азам, Ф., Фенчел, Т., Филд, Дж. Г., Грей, Дж. С., Мейер-Рейл, Л. А., и Тингстад, Т. Ф. (1983). Экологическая роль микробов водяного столба в море. Mar. Ecol. Прог. Сер. 10, 257–263. DOI: 10.3354 / meps010257

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бачи, К., Долан, Дж. Р., Лопес-Гарсия, П., Дешам, П., и Морейра, Д. (2013). Точность оценок разнообразия протистов: морфология по сравнению с клонированием и прямым пиросеквенированием генов 18S рРНК и ITS-регионов с использованием заметных инфузорий тинтиннид в качестве примера. ISME J. 7, 244–255. DOI: 10.1038 / ismej.2012.106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бахи, К., Гомес, Ф., Лопес-Гарсия, П., Долан, Дж. Р., и Морейра, Д. (2012). Молекулярная филогения тинтиннид инфузорий (тинтинниды, цилиофоры). Protist 163, 873–887. DOI: 10.1016 / j.protis.2012.01.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бачи К., Морейра Д., Долан Дж. Р. и Лопес-Гарсия П. (2014). Сезонная динамика свободноживущих сообществ инфузорий тинтиннид, выявленная по экологическим последовательностям Северо-Западного Средиземного моря. FEMS Microbiol.Ecol. 87, 330–342. DOI: 10.1111 / 1574-6941.12224

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Банерджи А., Бэгли М., Элк М., Пилигрим Э., Мартинсон Дж. И Санто-Доминго Дж. (2018). Пространственная и временная динамика сообщества пресноводного эукариотического планктона, выявленная с помощью метабаркодирования гена 18S рРНК. Hydrobiologia 818, 71–86. DOI: 10.1007 / s10750-018-3593-0

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Берджеб, Л., Парада, А., Нидхэм, Д. М., Фурман, Дж. А. (2018). Краткосрочная динамика и взаимодействия сообществ морских протистов во время весенне-летнего перехода. ISME J. 12, 1907–1917. DOI: 10.1038 / s41396-018-0097-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бок К., Сальчер М., Дженсен М., Пандей Р. В. и Бенигк Дж. (2018). Синхронность планктонных сообществ эукариот и прокариот в трех австрийских озерах, где проводился сезонный сбор проб. Фронт. Microbiol. 9: 1290. DOI: 10.3389 / fmicb.2018.01290

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Caporaso, J. G., Kuczynski, J., Stombaugh, J., Bittinger, K., Bushman, F. D., Costello, E. K., et al. (2010). QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Nat. Методы 7, 335–336. DOI: 10.1038 / nmeth.f.303

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кэрон, Д. А., Гаст, Р. Дж., Лим, Э. Л. и Деннет, М.Р. (1999). Структура сообщества протистана: молекулярные подходы к ответам на экологические вопросы. Hydrobiologia 401, 215–227. DOI: 10.1023 / A: 1003721923719

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Карриас, Дж. Ф., Амблард, К., и Бурдье, Г. (1998). Сезонная динамика и вертикальное распределение планктонных инфузорий и их связь с микробными пищевыми ресурсами в олигомезотрофном озере Павин. Arch. Hydrobiol. 143, 227–255. DOI: 10.1127 / архив-гидробиол / 143/1998/227

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Де Варгас, К., Audic, S., Henry, N., Decelle, J., Mahé, F., Logares, R., et al. (2015). Разнообразие эукариотического планктона в залитом солнцем океане. Наука 348: 6237. DOI: 10.1126 / science.1261605

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Долан Дж. Р. и Стоук Т. (2011). Повторный отбор проб показывает различную изменчивость в показателях видового богатства и состава сообществ планктонных простейших. Environ. Microbiol. Rep. 3, 661–666. DOI: 10.1111 / j.1758-2229.2011.00250.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дафф, Р. Дж., Болл, Х., Лаврентьев, П. Дж. (2008). Применение комбинированных морфолого-молекулярных подходов к идентификации планктонных простейших в пробах окружающей среды. J. Eukaryot. Microbiol. 55, 306–312. DOI: 10.1111 / j.1550-7408.2008.00328.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эдгар, Р. К., Хаас, Б. Дж., Клементе, Дж.К., Айва К. и Найт Р. (2011). UCHIME улучшает чувствительность и скорость обнаружения химер. Биоинформатика 27, 2194–2200. DOI: 10.1093 / биоинформатика / btr381

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эджкомб В., Орси В., Бунге Дж., Чон С., Кристен Р., Леслин С. и др. (2011). Микробная обсерватория Протистана в бассейне Кариако, Карибский бассейн. I. Пиросеквенирование и понимание Сэнгера видового богатства. ISME J. 5, 1344–1356.DOI: 10.1038 / ismej.2011.6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эгге, Э., Биттнер, Л., Андерсен, Т., Аудик, С., Де Варгас, К., и Эдвардсен, Б. (2013). 454 Пиросеквенирование для описания состава микробного эукариотического сообщества, разнообразия и относительной численности: тест на морские гаптофиты. PLoS One 8: e74371. DOI: 10.1371 / journal.pone.0074371

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фойсснер, В.(2014). Обновление «основных методов световой и сканирующей электронной микроскопии для таксономических исследований реснитчатых простейших». Внутр. J. Sys. Evol. Microbiol. 64, 271–292. DOI: 10.1099 / ijs.0.057893-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фойсснер В. и Бергер Х. (1996). Удобный справочник по инфузориям (Protozoa, Ciliophora), обычно используемым гидробиологами в качестве биоиндикаторов в реках, озерах и сточных водах, с примечаниями по их экологии. Freshw. Биол. 35, 375–482. DOI: 10.1111 / j.1365-2427.1996.tb01775.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фойсснер В., Бергер Х., Блаттерер Х. и Кохманн Ф. (1995). Taxonomische und ökologische revision der ciliaten des saprobiensystems. Группа IV: гимнастома, локсодес, суктория. informationsberichte des bayer. Landesamtes Wasserwirtschaft 1/95: 540.

Google Scholar

Фойсснер В., Бергер Х. и Кохманн Ф. (1992).Taxonomische und ökologische revision der ciliaten des saprobiensystems. Группа II: перитрихии, гетеротрихиды, одонтостоматиды. informationsberichte des bayer. Landesamtes Wasserwirtschaft 5/92: 502.

Google Scholar

Фойсснер В., Бергер Х. и Кохманн Ф. (1994). Taxonomische und ökologische revision der ciliaten des saprobiensystems. Группа III: гименостомы, простоматида, нассулида. informationsberichte des bayer. Landesamtes Wasserwirtschaft 1/94: 548.

Фойсснер В., Бергер Х. и Шаумбург Дж. (1999). Идентификация и экология инфузорий лимнетического планктона. Informationsberichte des Bayer. Landesamtes Wasserwirtschaft Heft 3/99: 793.

Google Scholar

Фойсснер В., Блаттерер Х., Бергер Х. и Кохманн Ф. (1991). Taxonomische und ökologische revision der ciliaten des saprobiensystems. Группа I: циртофориды, олиготрихиды, гипотрихии, кольподеи. Informationsberichte des bayer. Landesamtes Wasserwirtschaft 1/91: 478.

Google Scholar

Фойсснер В. и Пфистер Г. (1997). Таксономическая и экологическая ревизия уротрих (Ciliophora, Prostomatida) с тремя или более каудальными ресничками, включая удобный ключ. Limnologica 27, 311–347.

Google Scholar

Форстер Д., Дантхорн М., Стоук Т. и Маэ Ф. (2016). Сравнение трех подходов к кластеризации для обнаружения нового микробного разнообразия окружающей среды. PeerJ 4: e1692. DOI: 10.7717 / peerj.1692

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Форстер Д., Филкер С., Кохемс Р., Брейнер Х.-В., Кордье Т., Павловски Дж. И др. (2018). Сравнение различных генов метабаркода инфузорий в качестве биоиндикаторов для оценки воздействия на окружающую среду аквакультуры лосося. J. Eukaryot. Microbiol. doi: 10.1111 / jeu.12670 [Epub перед печатью].

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фу Р. и Гонг Дж.(2017). Анализ отдельных клеток, связывающий количество копий рибосомной (r) ДНК и рРНК с размером и скоростью роста клеток, дает представление об экологии молекулярного протистана. J. Eukaryot. Microbiol. 64, 885–896. DOI: 10.1111 / jeu.12425

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Gao, F., Warren, A., Zhang, Q., Gong, J., Miao, M., Sun, P., et al. (2016). Основанная на данных эволюционная гипотеза реснитчатых протистов с пересмотренной классификацией филума Ciliophora (Eukaryota.Альвеолаты). Sci. Отчет 6: 24874. DOI: 10.1038 / srep24874

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Геллер В., Берберович Р., Гаедке У., Мюллер Х., Паули Х. Р., Тильцер М. М. и др. (1991). Отношения между компонентами автотрофного и гетеротрофного планктона в сезонном цикле 1987 г. в Боденском озере. Verh. Междунар. Verein Limnol. 24, 831–836. DOI: 10.1080 / 03680770.1989.11898860

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гинер, К.Р., Форн, И., Ромак, С., Логарес, Р., Де Варгас, К., и Массана, Р. (2016). Секвенирование окружающей среды дает разумные оценки относительной численности конкретных пикоэукариот. Заявл. Environ. Microbiol. 82, 4757–4766. DOI: 10.1128 / aem.00560-16

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гонг Дж., Донг Дж., Лю X. и Массана Р. (2013). Чрезвычайно высокое число копий и полиморфизм оперона рДНК, оцененный на основе анализа отдельных клеток инфузорий олиготрих и перитрих. Protist 164, 369–379. DOI: 10.1016 / j.protis.2012.11.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хьюз, С. М., Хубер, Дж. А., Моррисон, Х. Г., Согин, М. Л., и Уэлч, Д. М. (2007). Точность и качество массово-параллельного пиросеквенирования ДНК. Genome Biol. 8: R143. DOI: 10.1186 / GB-2007-8-7-r143

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хьюз, С. М., Велч, Д. М., Моррисон, Х. Г., и Согин, М.Л. (2010). Разглаживание морщин в редкой биосфере за счет улучшенной кластеризации OTU. Environ. Microbiol. 12, 1889–1898. DOI: 10.1111 / j.1462-2920.2010.02193.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Джером, К. А., Монтань, Д. Дж. С., и Тейлор, Ф. Дж. Р. (1993). Влияние количественного окрашивания протарголом и фиксаторов Люголя и Буэна на размер клеток: более точная оценка биомассы видов инфузорий. J. Eukaryot. Microbiol. 40, 254–259. DOI: 10.1111 / j.1550-7408.1993.tb04913.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кисанд В., Зингель П. (2000). Преобладание поедания инфузорий бактериями весной в мелководном эвтрофном озере. Aquat. Microb. Ecol. 22, 135–142. DOI: 10.3354 / ame022135

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Lane, D.J. (1991). «Секвенирование 16S / 23S» в Nucleic Acid Technologies in Bacterial Systematic , ред. Э. Стакебрандт и М.Гудфеллоу (Нью-Йорк, Нью-Йорк: Wiley), 115–175.

Google Scholar

Лю А., Йи З., Лин Х., Ху Х., Аль-Фаррадж С. А. и Аль-Рашейд К. А. С. (2015). Молекулярно-филогенетическая линия Plagiopogon и Askenasia (Protozoa, Ciliophora), выявленная по их последовательностям генов. J. Ocean Univ. Китай 14, 724–730. DOI: 10.1007 / s11802-015-2559-3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Луо, В., Бок, К., Ли, Х. Р., Падисак, Дж., и Krienitz, L. (2011). Молекулярное и микроскопическое разнообразие планктонных эукариот в олиготрофном озере Стехлин (Германия). Hydrobiologia 661, 133–143. DOI: 10.1007 / s10750-010-0510-6

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Линн, Д. Х. (2008). Ресничные простейшие. Характеристика, классификация и руководство по литературе , 3-е изд. Берлин: Springer.

Google Scholar

Мацек, М., Шимек, К., Пернталер, Дж., Выхналек, В.и Р. Псеннер (1996). Темпы роста доминирующих планктонных инфузорий в двух пресноводных водоемах разной трофической степени. J. Plankt. Res. 18, 463–481. DOI: 10.1093 / планкт / 18.4.463

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Марин Б., Палм А., Клингберг М. А. X. и Мелконян М. (2003). Филогения и таксономическая ревизия пластидсодержащих эвгленофитов на основе сравнения последовательностей рДНК SSU и синапоморфных сигнатур во вторичной структуре рРНК SSU. Protist 154, 99–145. DOI: 10.1078 / 143446103764928521

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мартин, М. (2011). Cutadapt удаляет последовательности адаптеров из операций чтения с высокой пропускной способностью. EMBnet.Journal 17, 10–12. DOI: 10.14806 / ej.17.1.200

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Матес, Дж., И Арндт, Х. (1995). Годовой цикл протозоопланктона (инфузорий, жгутиконосцев и саркодинов) по отношению к фито- и метазоопланктону в озере Ноймюлер-Зее (Мекленбург, Германия). Arch. Hydrobiol. 134, 337–358.

Google Scholar

Medinger, R., Nolte, V., Pandey, R.V, Jost, S., Ottenwälder, B., Schlötterer, C., et al. (2010). Разнообразие в скрытом мире: потенциал и ограничения секвенирования следующего поколения для исследований молекулярного разнообразия эукариотических микроорганизмов. Мол. Ecol. 19, 32–40. DOI: 10.1111 / j.1365-294X.2009.04478.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Медлин, Л., Элвуд, Х. Дж., Стикель, С., и Согин, М. Л. (1988). Характеристика ферментативно амплифицированных областей, кодирующих 16S-подобную рРНК эукариот. Ген 71, 491–499. DOI: 10.1016 / 0378-1119 (88)

-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Михайлов И.С., Захарова Ю.Р., Букин Ю.С., Галачянц Ю.П., Петрова Д.П., Сакирко М.В. и др. (2018). Сети совместного возникновения среди бактерий и микробных эукариот озера Байкал во время весеннего цветения фитопланктона. Microb. Ecol. 77, 96–109. DOI: 10.1007 / s00248-018-1212-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Монтань, Д. Дж. С., и Линн, Д. Х. (1987). Количественное окрашивание протарголом (QPS) на инфузории: описание метода и определение его количественной природы. Mar. Microb. Food Webs 2, 83–93.

Google Scholar

Мюллер Х. и Геллер У. (1993). Максимальные темпы роста водных реснитчатых простейших: пересмотр зависимости от размера тела и температуры. Arch. Hydrobiol. 126, 315–327.

Google Scholar

Мюллер, Х., Шене, А., Пинто-Коэльо, Р. М., Швайцер, А., и Вайсс, Т. (1991). Сезонная гибель инфузорий в Боденском озере. Microb. Ecol. 21, 119–138. DOI: 10.1007 / BF02539148

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Накаяма Т., Марин Б., Кранц Х. Д., Сурек Б., Хус В. А. Р., Иноуэ И. и др. (1998). Базальное положение чешуйчатых зеленых жгутиконосцев среди зеленых водорослей (Chlorophyta) выявляется путем анализа кодируемых ядром последовательностей рРНК SSU. Protist 149, 367–380. DOI: 10.1016 / S1434-4610 (98) 70043-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Нольте, В., Пандей, Р. В., Йост, С., Мединджер, Р., Оттенвельдер, Б., Бенигк, Дж. И др. (2010). Контрастное сезонное разделение ниш между редкими и многочисленными таксонами скрывает степень разнообразия протистов. Мол. Ecol. 19, 2908–2915. DOI: 10.1111 / j.1365-294X.2010.04669.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Петру, К., и Нильсен, Д. А. (2018). Поглощение диметилсульфониопропионата (DMSP) диатомовыми водорослями Thalassiosira weissflogii : модель для исследования клеточной функции DMSP. Биогеохимия 141, 265–271. DOI: 10.1007 / s10533-018-0507-1

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пфистер, Г., Зоннтаг, Б., и Пош, Т. (1999). Сравнение прямого подсчета живых организмов и улучшенного количественного окрашивания протарголом (QPS) при определении численности и клеточных объемов пелагических пресноводных простейших. Aquat. Microb. Ecol. 18, 95–103. DOI: 10.3354 / ame018095

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пош, Т., Эугстер, Б., Помати, Ф., Пернталер, Дж., Питч, Г., и Эккерт, Э. М. (2015). Сеть взаимодействий между инфузориями и фитопланктоном весной. Фронт. Microbiol. 6: 1289. DOI: 10.3389 / fmicb.2015.01289

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Posch, T., Köster, O., Salcher, M. M., and Pernthaler, J.(2012). Вредные нитчатые цианобактерии, которым способствует снижение круговорота воды при потеплении озера. Nat. Клим. Изменить 2, 809–813. DOI: 10.1038 / nclimate1581

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сантоферрара, Л. Ф., Граттепанче, Ж.-Д., Кац, Л. А., и Макманус, Г. Б. (2014). Пиросеквенирование для оценки разнообразия эукариотических микробов: анализ данных о морских планктонных инфузориях и сравнение с традиционными методами. Environ. Microbiol. 16, 2752–2763.DOI: 10.1111 / 1462-2920.12380

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сантоферрара, Л. Ф., Граттепанче, Ж.-Д., Кац, Л. А., и Макманус, Г. Б. (2016). Паттерны и процессы в микробной биогеографии: дают ли молекулы и морфологии одинаковые ответы? ISME J. 10, 1779–1790. DOI: 10.1038 / ismej.2015.224

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шакья, М., Айва, К., Кэмпбелл, Дж. Х., Янг, З. К., Шадт, К.W., and Podar, M. (2013). Сравнительная характеристика метагеномного и микробного разнообразия рРНК с использованием синтетических сообществ архей и бактерий. Environ. Microbiol. 15, 1882–1899. DOI: 10.1111 / 1462-2920.12086

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шимек, К., Бобкова, Дж., Мацек, М., Недома, Дж., И Псеннер, Р. (1995). Выпас инфузорий на пикопланктоне в эвтрофном водоеме во время летнего максимума фитопланктона: исследование на уровне видов и сообществ. Лимнол. Oceanogr. 40, 1077–1090. DOI: 10.4319 / lo.1995.40.6.1077

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шимек, К., Недома, Дж., Значор, П., Касалицки, В., Езбера, Дж., Хорнак, К., и др. (2014). Точно настроенная симфония факторов модулирует микробную пищевую сеть пресноводного водоема весной. Лимнол. Oceanogr. 59, 1477–1492. DOI: 10.4319 / lo.2014.59.5.1477

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Симон, М., Лопес-Гарсия, П., Дешам П., Морейра Д., Ресту Г., Бертолино П. и др. (2015). Выраженная сезонность и высокая пространственная изменчивость сообществ протистов в мелководных пресноводных системах. ISME J. 9, 1941–1953. DOI: 10.1038 / ismej.2015.6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Скиббе, О. (1994). Улучшенное количественное окрашивание протарголом инфузорий и других планктонных протистов. Arch. Hydrobiol. 130, 339–347.

Google Scholar

Соммаруга, р.и Р. Псеннер (1993). Наноцилии отряда prostomatida: их значение в микробной пищевой сети мезотрофного озера. Aquat. Sci. 55, 179–187. DOI: 10.1007 / BF00877447

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зоммер У., Адриан Р., Де Сенерпонт Домис Л., Эльзер Дж. Дж., Гаедке У., Ибелингс Б. и др. (2012). За пределами модели группы экологии планктона (ПЭГ): механизмы, управляющие сукцессией планктона. Annu. Rev. Ecol. Evol. Syst. 43, 429–448.DOI: 10.1146 / annurev-ecolsys-110411-160251

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зоммер, У., Гливич, З. М., Ламперт, В., и Дункан, А. (1986). PEG-модель сезонной сукцессии планктонных явлений в пресных водах. Arch. Hydrobiol. 106, 433–471.

Google Scholar

Зоннтаг, Б., Пош, Т., Кламмер, С., Тойбнер, К., и Псеннер, Р. (2006). Фаготрофные инфузории и жгутиковые в олиготрофном глубоком альпийском озере: контрастная изменчивость в зависимости от сезона и глубины. Aquat. Microb. Ecol. 43, 193–207. DOI: 10.3354 / ame043193

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Sonntag, B., Strüder-Kypke, M.C., and Summerer, M. (2008). Uroleptus willii ноябрь. sp., эупланктонная пресноводная инфузория (Dorsomarginalia, Spirotrichea, Ciliophora) с водорослевыми симбионтами: морфологическое описание, включая филогенетические данные последовательности гена малой субъединицы рРНК и экологические примечания. Денис 23, 279–288.

Google Scholar

Стоук, Т., Bass, D., Nebel, M., Christen, R., Jones, M. D. M., Breiner, H.-W., et al. (2010). Секвенирование ДНК окружающей среды с множественными маркерами параллельных меток выявляет очень сложное сообщество эукариот в морской бескислородной воде. Мол. Ecol. 19, 21–31. DOI: 10.1111 / j.1365-294X.2009.04480.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стоук Т., Брейнер Х.-В., Филкер С., Остермайер В., Каммерландер Б. и Зоннтаг Б. (2014). Морфогенетическое исследование планктона инфузорий из горного озера указывает на необходимость маркеров штрих-кода, специфичных для клонов, в микробной экологии. Environ. Microbiol. 16, 430–444. DOI: 10.1111 / 1462-2920.12194

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стоук Т., Хейворд Б., Тейлор Г. Т., Варела Р. и Эпштейн С. С. (2006). Подход с использованием нескольких ПЦР-праймеров для доступа к разнообразию микроэукариот в образцах окружающей среды. Protist 157, 31–43. DOI: 10.1016 / j.protis.2005.10.004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стоук Т., Кочемс Р., Форстер Д., Лейзерович Ф. и Павловски Дж. (2018). Метабаркодирование сообществ бентосных инфузорий показывает высокий потенциал экологического мониторинга в аквакультуре лосося. Ecol. Индийский. 85, 153–164. DOI: 10.1016 / j.ecolind.2017.10.041

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стрейле, Д. (1998). Распределение биомассы и поток углерода в пелагической пищевой сети Боденского озера. Arch. Hydrobiol. Спец. Проблемы Advanc. Лимнол. 53,545–563.

Google Scholar

Танабэ, А.С., Нагаи, С., Хида, К., Ясуике, М., Фудзивара, А., Накамура, Ю. и др. (2016). Сравнительное исследование пригодности трех регионов гена 18S-рРНК для мониторинга планктонного сообщества эукариот на основе массового параллельного секвенирования. Мол. Ecol. Ресурс. 16, 402–414. DOI: 10.1111 / 1755-0998.12459

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тирок, К., Гаедке, У. (2007). Регулирование динамики и функционального состава планктонных инфузорий весной в Боденском озере. Aquat. Microb. Ecol. 49, 87–100. DOI: 10.3354 / ame01127

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Tragin, M., Zingone, A., and Vaulot, D. (2018). Сравнение состава прибрежного фитопланктона, оцененного по участкам V4 и V9 гена 18S рРНК, с акцентом на фотосинтетические группы и особенно Chlorophyta. Environ. Microbiol. 20, 506–520. DOI: 10.1111 / 1462-2920.13952

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wear, E.К., Уилбэнкс, Э. Г., Нельсон, К. Э., и Карлсон, К. А. (2018). Выбор праймера влияет на численность конкретной популяции, но не на динамику сообщества в ежемесячном анализе ампликона гена 16S рРНК во временном ряду прибрежного морского бактериопланктона. Environ. Microbiol. 20, 2709–2726. DOI: 10.1111 / 1462-2920.14091

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вебер А.Т., Павловски Дж. (2013). Можно ли определить численность простейших на основании данных о последовательностях: на примере фораминифер. PLoS One 8: e56739. DOI: 10.1371 / journal.pone.0056739

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Weisse, T., Müller, H., Pinto-Coelho, R.M., Schweizer, A., Springmann, D., and Baldringer, G. (1990). Ответ микробной петли на весеннее цветение фитопланктона в большом предальпийском озере. Лимнол. Oceanogr. 35, 781–794. DOI: 10.4319 / lo.1990.35.4.0781

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Янкова Ю., Нойеншвандер С., Кёстер, О., Пош, Т. (2017). Резкая остановка глубоководного водооборота с потеплением озера: серьезные последствия для первичных продуцентов водорослей. Sci. Отчет 7: 13770. DOI: 10.1038 / s41598-017-13159-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжу Ф., Массана Р., Нот Ф., Мари Д. и Вауло Д. (2005). Картирование пикоэукариот в морских экосистемах с количественной ПЦР гена 18S рРНК. FEMS Microbiol. Ecol. 52, 79–92. DOI: 10.1016 / j.фемсек.2004.10.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зингель П., Агасильд Х., Ныгес Т. и Кисанд В. (2007). Инфузории являются основными травоядными на пико- и нанопланктоне в мелком, естественно высоко эвтрофном озере. Microb. Ecol. 53, 134–142. DOI: 10.1007 / s00248-006-9155-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zingel, P., and Nõges, T. (2010). Сезонная и годовая динамика численности инфузорий мелководного эвтрофного озера. Фонд. Прил. Лимнол. 176, 133–143. DOI: 10.1127 / 1863-9135 / 2010 / 0176-0133

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Метод Протаргола Бодиана, Электронная микроскопия наук

Положения и условия

Спасибо, что посетили наш сайт. Эти условия использования применимы к веб-сайтам США, Канады и Пуэрто-Рико (далее «Веб-сайт»), которыми управляет VWR («Компания»). Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, посетите соответствующий международный веб-сайт по адресу www.vwr.com, чтобы ознакомиться с применимыми положениями и условиями. Все пользователи веб-сайта подчиняются следующим условиям использования веб-сайта (эти «Условия использования»). Пожалуйста, внимательно прочтите эти Условия использования перед доступом или использованием любой части веб-сайта. Заходя на веб-сайт или используя его, вы соглашаетесь с тем, что вы прочитали, поняли и соглашаетесь соблюдать настоящие Условия использования с внесенными в него время от времени поправками, а также Политику конфиденциальности компании, которая настоящим включена в настоящие Условия. использования. Если вы не желаете соглашаться с настоящими Условиями использования, не открывайте и не используйте какие-либо части веб-сайта.

Компания может пересматривать и обновлять настоящие Условия использования в любое время без предварительного уведомления, разместив измененные условия на веб-сайте. Продолжение использования вами веб-сайта означает, что вы принимаете и соглашаетесь с пересмотренными Условиями использования. Если вы не согласны с Условиями использования (с внесенными время от времени поправками) или недовольны Веб-сайтом, ваше единственное и исключительное средство правовой защиты — прекратить использование Веб-сайта.

Использование сайта

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, предназначена только для информационных целей. Хотя считается, что информация верна на момент публикации, вам следует самостоятельно определить ее пригодность для вашего использования. Не все продукты или услуги, описанные на этом веб-сайте, доступны во всех юрисдикциях или для всех потенциальных клиентов, и ничто в настоящем документе не предназначено как предложение или ходатайство в какой-либо юрисдикции или какому-либо потенциальному покупателю, где такое предложение или продажа не соответствует требованиям.

Приобретение товаров и услуг

Настоящие Условия и положения распространяются только на использование веб-сайта. Обратите внимание, что условия, касающиеся обслуживания, продаж продуктов, рекламных акций и других связанных мероприятий, можно найти по адресу https://us.vwr.com/store/content/externalContentPage.jsp?path=/en_US/about_vwr_terms_and_conditions.jsp , и эти условия регулируют любые покупки продуктов или услуг у Компании.

Интерактивные функции

Веб-сайт может содержать службы досок объявлений, области чата, группы новостей, форумы, сообщества, личные веб-страницы, календари и / или другие средства сообщения или коммуникации, предназначенные для того, чтобы вы могли общаться с общественностью в целом или с группой ( вместе «Функция сообщества»).Вы соглашаетесь использовать функцию сообщества только для публикации, отправки и получения сообщений и материалов, которые являются надлежащими и относятся к конкретной функции сообщества. Вы соглашаетесь использовать веб-сайт только в законных целях.

A. В частности, вы соглашаетесь не делать ничего из следующего при использовании функции сообщества:

1. Опорочить, оскорбить, преследовать, преследовать, угрожать или иным образом нарушать законные права (например, право на неприкосновенность частной жизни и гласность) других.
2. Публиковать, размещать, загружать, распространять или распространять любую неуместную, непристойную, дискредитирующую, нарушающую авторские права, непристойную, непристойную или незаконную тему, название, материал или информацию.
3. Загружайте файлы, содержащие программное обеспечение или другие материалы, защищенные законами об интеллектуальной собственности (или правами на неприкосновенность частной жизни), если вы не владеете или не контролируете права на них или не получили все необходимое согласие.
4. Загрузите файлы, содержащие вирусы, поврежденные файлы или любое другое подобное программное обеспечение или программы, которые могут повредить работу чужого компьютера.
5. Перехватить или попытаться перехватить электронную почту, не предназначенную для вас.
6. Рекламировать или предлагать продавать или покупать какие-либо товары или услуги для любых деловых целей, если такая функция сообщества специально не разрешает такие сообщения.
7. Проводите или рассылайте опросы, конкурсы, финансовые пирамиды или письма счастья.
8. Загрузите любой файл, опубликованный другим пользователем функции сообщества, который, как вы знаете или разумно должен знать, не может быть законно распространен таким образом или что у вас есть договорное обязательство сохранять конфиденциальность (несмотря на его доступность на веб-сайте).
9. Подделывать или удалять любые ссылки на автора, юридические или другие надлежащие уведомления, обозначения собственности или ярлыки происхождения или источника программного обеспечения или других материалов, содержащихся в загружаемом файле.
10. Предоставление ложной информации о принадлежности к какому-либо лицу или организации.
11. Участвовать в любых других действиях, которые ограничивают или препятствуют использованию веб-сайта кем-либо или которые, по мнению Компании, могут нанести вред Компании или пользователям веб-сайта или подвергнуть их ответственности.
12. Нарушать любые применимые законы или постановления или нарушать любой кодекс поведения или другие правила, которые могут быть применимы к какой-либо конкретной функции Сообщества.
13. Собирать или иным образом собирать информацию о других, включая адреса электронной почты, без их согласия.

B. Вы понимаете и признаете, что несете ответственность за любой контент, который вы отправляете, вы, а не Компания, несете полную ответственность за такой контент, включая его законность, надежность и уместность. Если вы публикуете сообщения от имени или от имени вашего работодателя или другой организации, вы заявляете и гарантируете, что у вас есть на это право. Загружая или иным образом передавая материалы в любую часть веб-сайта, вы гарантируете, что эти материалы являются вашими собственными или находятся в общественном достоянии или иным образом свободны от проприетарных или иных ограничений, и что вы имеете право размещать их на веб-сайте.Кроме того, загружая или иным образом передавая материалы в любую область веб-сайта, вы предоставляете Компании безотзывное, бесплатное, всемирное право на публикацию, воспроизведение, использование, адаптацию, редактирование и / или изменение таких материалов любым способом, в любые и все средства массовой информации, известные в настоящее время или обнаруженные в будущем во всем мире, в том числе в Интернете и World Wide Web, для рекламных, коммерческих, торговых и рекламных целей, без дополнительных ограничений или компенсации, если это не запрещено законом, и без уведомления, проверки или одобрения.

C. Компания оставляет за собой право, но не принимает на себя никакой ответственности (1) удалить любые материалы, размещенные на веб-сайте, которые Компания по своему собственному усмотрению сочтет несовместимыми с вышеуказанными обязательствами или иным образом неприемлемыми по любой причине. ; и (2) прекратить доступ любого пользователя ко всему или части веб-сайта. Однако Компания не может ни просмотреть все материалы до того, как они будут размещены на веб-сайте, ни обеспечить быстрое удаление нежелательных материалов после их размещения.Соответственно, Компания не несет ответственности за какие-либо действия или бездействие в отношении передач, сообщений или контента, предоставленных третьими сторонами. Компания оставляет за собой право предпринимать любые действия, которые она сочтет необходимыми для защиты личной безопасности пользователей этого веб-сайта и общественности; тем не менее, Компания не несет ответственности перед кем-либо за выполнение или невыполнение действий, описанных в этом параграфе.

D. Несоблюдение вами положений пунктов (A) или (B) выше может привести к прекращению вашего доступа к веб-сайту и может подвергнуть вас гражданской и / или уголовной ответственности.

Особое примечание о содержании функций сообщества

Любой контент и / или мнения, загруженные, выраженные или отправленные с помощью любой функции сообщества или любого другого общедоступного раздела веб-сайта (включая области, защищенные паролем), а также все статьи и ответы на вопросы, кроме контента, явно разрешенного Компания, являются исключительно мнениями и ответственностью лица, представляющего их, и не обязательно отражают мнение Компании.Например, любое рекомендованное или предлагаемое использование продуктов или услуг, доступных от Компании, которое публикуется через функцию сообщества, не является признаком одобрения или рекомендации со стороны Компании. Если вы решите следовать какой-либо такой рекомендации, вы делаете это на свой страх и риск.

Ссылки на сторонние сайты

Веб-сайт может содержать ссылки на другие веб-сайты в Интернете. Компания не несет ответственности за контент, продукты, услуги или методы любых сторонних веб-сайтов, включая, помимо прочего, сайты, связанные с Веб-сайтом или с него, сайты, созданные на Веб-сайте, или стороннюю рекламу, и не делает заявлений относительно их качество, содержание или точность.Наличие ссылок с веб-сайта на любой сторонний веб-сайт не означает, что мы одобряем, поддерживаем или рекомендуем этот веб-сайт. Мы отказываемся от всех гарантий, явных или подразумеваемых, в отношении точности, законности, надежности или действительности любого контента на любых сторонних веб-сайтах. Вы используете сторонние веб-сайты на свой страх и риск и в соответствии с условиями использования таких веб-сайтов.

Права собственности на контент

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что все содержимое веб-сайта (включая всю информацию, данные, программное обеспечение, графику, текст, изображения, логотипы и / или другие материалы), а также его дизайн, выбор, сбор, расположение и сборка являются являются собственностью Компании и защищены законами США и международными законами об интеллектуальной собственности.Вы имеете право использовать содержимое веб-сайта только в личных или законных деловых целях. Вы не можете копировать, изменять, создавать производные работы, публично демонстрировать или исполнять, переиздавать, хранить, передавать, распространять, удалять, удалять, дополнять, добавлять, участвовать в передаче, лицензировать или продавать какие-либо материалы в Интернете. Сайт без предварительного письменного согласия Компании, за исключением: (а) временного хранения копий таких материалов в ОЗУ, (б) хранения файлов, которые автоматически кэшируются вашим веб-браузером в целях улучшения отображения, и (в) печати разумного количество страниц веб-сайта; в каждом случае при условии, что вы не изменяете и не удаляете какие-либо уведомления об авторских правах или других правах собственности, включенные в такие материалы.Ни название, ни какие-либо права интеллектуальной собственности на любую информацию или материалы на веб-сайте не передаются вам, а остаются за Компанией или соответствующим владельцем такого контента.

Товарные знаки

Название и логотип компании, а также все связанные названия, логотипы, названия продуктов и услуг, появляющиеся на веб-сайте, являются товарными знаками компании и / или соответствующих сторонних поставщиков. Их нельзя использовать или повторно отображать без предварительного письменного согласия Компании.

Отказ от ответственности

Компания не несет никакой ответственности за материалы, информацию и мнения, предоставленные или доступные через Веб-сайт («Контент сайта»). Вы полагаетесь на Контент сайта исключительно на свой страх и риск. Компания не несет никакой ответственности за травмы или убытки, возникшие в результате использования любого Контента Сайта.
ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА И ПРОДУКТЫ И УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ИЛИ ДОСТУПНЫЕ ЧЕРЕЗ САЙТ, ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ НА УСЛОВИЯХ «КАК ЕСТЬ» И «ПО ДОСТУПНОСТИ», СО ВСЕМИ ОШИБКАМИ.КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ ИЛИ ЗАЯВЛЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ КАЧЕСТВА, ТОЧНОСТИ ИЛИ ДОСТУПНОСТИ ВЕБ-САЙТА. В частности, НО БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЯ ВЫШЕИЗЛОЖЕННОГО, НИ КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ГАРАНТИРУЕТ ИЛИ ЗАЯВЛЯЕТ, ЧТО ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ИЛИ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ С ПОМОЩЬЮ САЙТА, ​​БУДУТ ТОЧНЫМИ, НАДЕЖНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ЧТО ДЕФЕКТЫ БУДУТ ИСПРАВЛЕНЫ; ЧТО ВЕБ-САЙТ ИЛИ СЕРВЕР, ДЕЛАЮЩИЙ ЕГО ДОСТУПНЫМ, НЕ СОДЕРЖИТ ВИРУСОВ ИЛИ ДРУГИХ ВРЕДНЫХ КОМПОНЕНТОВ; ИНАЧЕ ВЕБ-САЙТ ОТВЕЧАЕТ ВАШИМ ПОТРЕБНОСТЯМ ИЛИ ОЖИДАНИЯМ.КОМПАНИЯ ОТКАЗЫВАЕТСЯ ОТ ВСЕХ ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ, ВКЛЮЧАЯ ЛЮБЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ И НЕ НАРУШЕНИЯ.
НИ ПРИ КАКИХ ОБСТОЯТЕЛЬСТВАХ КОМПАНИЯ ИЛИ ЕЕ ЛИЦЕНЗИАРЫ ИЛИ ПОДРЯДЧИКИ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ЛЮБОЙ ВИД ЛЮБОГО ВИДА УЩЕРБА, ВЫЯВЛЕННОГО ИЛИ В СВЯЗИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВАМИ ИЛИ НЕВОЗМОЖНОСТЬЮ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ЛЮБЫЕ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ ИЛИ ЛЮБОЙ САЙТ, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ПРЯМЫЕ, КОСВЕННЫЕ, СЛУЧАЙНЫЕ, СПЕЦИАЛЬНЫЕ, КОСВЕННЫЕ ИЛИ КАРАТНЫЕ УБЫТКИ, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧИВАЯСЯ, ЛИЧНЫЕ ТРАВМЫ, ПОТЕРЯ ФРАГОВ ИЛИ УЩЕРБ , ВИРУСЫ, УДАЛЕНИЕ ФАЙЛОВ ИЛИ ЭЛЕКТРОННЫХ СООБЩЕНИЙ, ИЛИ ОШИБКИ, УПУЩЕНИЯ ИЛИ ДРУГИЕ НЕТОЧНОСТИ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ СОДЕРЖАНИИ САЙТА ИЛИ УСЛУГ, ИЛИ ИЛИ НЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ КОМПАНИЯ, И ПРЕДОСТАВЛЯЛА ЛИ КОМПАНИЯ ВОЗМОЖНОСТЬ ЛЮБЫЕ ТАКИЕ УБЫТКИ, ЕСЛИ НЕ ЗАПРЕЩЕНЫ ПРИМЕНИМЫМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ.

Компенсация

Вы соглашаетесь возместить и обезопасить Компанию и ее должностных лиц, директоров, агентов, сотрудников и других лиц, участвующих в веб-сайте, от любых обязательств, расходов, убытков и издержек, включая разумные гонорары адвокатам, возникающих в результате любое нарушение вами настоящих Условий использования, использование вами веб-сайта или любых продуктов, услуг или информации, полученных с веб-сайта или через него, ваше подключение к веб-сайту, любой контент, который вы отправляете на веб-сайт через любые Функция сообщества или нарушение вами каких-либо прав другого лица.

Применимое право; Международное использование

Настоящие условия регулируются и толкуются в соответствии с законами штата Пенсильвания без учета каких-либо принципов коллизионного права. Вы соглашаетесь с тем, что любые судебные иски или иски, вытекающие из настоящих Условий использования или связанные с ними, будут подаваться исключительно в суды штата или федеральные суды, расположенные в Пенсильвании, и вы тем самым соглашаетесь и подчиняетесь личной юрисдикции таких судов для цели судебного разбирательства по любому подобному действию.
Настоящие Условия использования применимы к пользователям в США, Канаде и Пуэрто-Рико. Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Если вы решите получить доступ к этому веб-сайту из-за пределов указанных юрисдикций, а не использовать доступные международные сайты, вы соглашаетесь с настоящими Условиями использования и тем, что такие условия будут регулироваться и толковаться в соответствии с законами США и штата. Пенсильвании и что мы не делаем никаких заявлений о том, что материалы или услуги на этом веб-сайте подходят или доступны для использования в этих других юрисдикциях.В любом случае все пользователи несут ответственность за соблюдение местных законов.

Общие условия

Настоящие Условия использования, в которые время от времени могут вноситься поправки, представляют собой полное соглашение и понимание между вами и нами, регулирующее использование вами Веб-сайта. Наша неспособность реализовать или обеспечить соблюдение какого-либо права или положения Условий использования не означает отказ от такого права или положения. Если какое-либо положение Условий использования будет признано судом компетентной юрисдикции недействительным, вы, тем не менее, соглашаетесь с тем, что суд должен попытаться реализовать намерения сторон, отраженные в этом положении и других положениях Условия использования остаются в силе.Ни ваши деловые отношения или поведение между вами и Компанией, ни какая-либо торговая практика не может считаться изменением настоящих Условий использования. Вы соглашаетесь с тем, что независимо от какого-либо закона или закона об обратном, любые претензии или основания для иска, вытекающие из или связанные с использованием Сайта или Условий использования, должны быть поданы в течение одного (1) года после такой претензии или причины. иска возникла или будет навсегда запрещена. Любые права, прямо не предоставленные в настоящем документе, сохраняются за Компанией.Мы можем прекратить ваш доступ или приостановить доступ любого пользователя ко всему сайту или его части без предварительного уведомления за любое поведение, которое мы, по нашему собственному усмотрению, считаем нарушением любого применимого законодательства или наносящим ущерб интересам другого пользователя. , стороннего поставщика, поставщика услуг или нас. Любые вопросы, касающиеся настоящих Условий использования, следует направлять по адресу [email protected].

Жалобы на нарушение авторских прав

Мы уважаем чужую интеллектуальную собственность и просим наших пользователей поступать так же.Если вы считаете, что ваша работа была скопирована и доступна на Сайте способом, который представляет собой нарушение авторских прав, вы можете уведомить нас, предоставив нашему агенту по авторским правам следующую информацию:

• электронная или физическая подпись лица, уполномоченного действовать от имени правообладателя;

• описание работы, защищенной авторским правом, в отношении которой были нарушены ваши претензии;

• идентификация URL-адреса или другого конкретного места на Сайте, где находится материал, который, по вашему мнению, нарушает авторские права;

• ваш адрес, номер телефона и адрес электронной почты;

• заявление, что у вас есть добросовестное предположение, что спорное использование не разрешено владельцем авторского права, его агентом или законом; и

• ваше заявление, сделанное под страхом наказания за лжесвидетельство, о том, что приведенная выше информация в вашем уведомлении является точной и что вы являетесь владельцем авторских прав или уполномочены действовать от имени владельца авторских прав.

С нашим агентом для уведомления о жалобах на нарушение авторских прав на Сайте можно связаться по адресу: [email protected].

Eichengrün, Артур | Encyclopedia.com

( b . Аахен, Германия, 13 августа 1867 г .;

d . Бад-Виззее, Германия, 23 декабря 1949 г.), Макромолекулярная химия, промышленность пластмасс, фармацевтическая химия, фотохимия .

В конце 1890-х Эйхенгрюн открыл протаргол, очень успешное лекарство от гонореи, а также аспирин.Он продолжил разработку процессов производства материалов из ацетата целлюлозы и посвятил остаток своей жизни техническому и экономическому развитию пластмасс, лаков, эмалей и искусственных волокон на основе ацетата целлюлозы. Во время Первой мировой войны его относительно негорючие лаки из синтетического ацетата целлюлозы сыграли важную роль в авиастроении. Он также был пионером в технике литья под давлением.

Артур Эйхенгрюн родился в Аахене, Германия, 13 августа 1867 года в еврейской семье фабрикантов ткани и получил образование в гимназии кайзера Карла, а затем поступил в Ахенскую техническую школу.Он закончил бакалавриат в Берлине у А. Вильгельма Хофманна и Карла Либермана, затем вернулся в Аахен в 1888 году, чтобы подготовить докторскую диссертацию под названием Über das Methoxy-oxy-dihydrocarbostyril под руководством Альфреда Эйн-Хорна (по формальным причинам Эйхенгрюн получил докторскую степень в Университете Эрлангена в 1890 году, поскольку в то время Высшая техническая школа еще не имела права присуждать докторскую степень). Он остался с Эйнхорном в Аахене, чтобы изучить деградацию кокаина, затем стал личным ассистентом Карла Гребе в Женевском университете.В 1892 году его пригласили начать производство кокаина на фирме К. Х. Берингер Зон из Ингельхайма-на-Рейне. Год спустя он перешел в компанию Balzer & Co. в Грюнау, недалеко от Берлина, но вскоре перешел к L.C. Marquardt из Бонн-Буэля. В 1894 году он женился на американке Элизабет Фешхаймер, от которой у него было четверо детей. После развода в 1905 году он женился на голландке Мадлен Мейнссен, которая родила ему двоих детей. Этот брак распался в 1921 году, и в 1927 году он женился на Люси Анриетт Гарче.

Работа в Bayer . Во время работы в L.C. Marquardt Eichengrün разработал комплекс йодоформа с гексамином в качестве антисептика без запаха и исследовал комплекс серебра с белком в качестве альтернативы нитрату серебра для местного лечения гонореи. Не имея возможности оценить это, он обратился к Теобальду Флоре, врачу компании Farbenfabriken vormals Friedrich Bayer & Co. из Эльберфельда. Это привело к тому, что его препарат оказался эффективным, и права на него были затем куплены Ф.Bayer & Co. 1 октября 1896 г. Эйхенгрюн стал сотрудником компании, ответственной за разработку новых лекарств. Его комплекс серебро-белок продавался в следующем году как Протаргол и был препаратом выбора для лечения гонореи до 1940-х годов. Как единственный изобретатель этого успешного препарата, Айхенгрюн получил 5 процентов чистой прибыли в виде роялти. Это сделало его относительно богатым человеком, который смог основать свою собственную компанию, когда покинул Bayer в 1908 году.

Эйхенгрюн также производил железную соматозу, другой белковый комплекс, в качестве перорального препарата железа, который не раздражал стенки желудка.За этими ранними препаратами последовали несколько других, в том числе антисептик гельмитол (гексаметилентетрамин) и цитарин (натриевая соль метилен лимонной кислоты), знаменитый лекарственный препарат аспирин (ацетилсалициловая кислота) и заменитель метилсалицилата мезотан (метоксиметилсалицилат) без запаха.

Работа над аспирином проводилась Феликсом Хоффманном, действующим под руководством Эйхенгрюна. На протяжении многих лет Хоффманну приписывали открытие аспирина на основании анекдотической сноски в энциклопедии, опубликованной в нацистской Германии в 1934 году.Как еврей, Эйхенгрюн в то время не мог публично оспорить это, но в 1944 году он опроверг это в длинном письме, отправленном из концентрационного лагеря Теризенштадт руководству IG Farben, в которое Ф. Байер и Ко. включены. Это был призыв о помощи от его бывшего работодателя, в котором был изложен его вклад в успех компании. Текст, касающийся аспирина, был немного изменен для публикации в Die Pharmazie незадолго до смерти Эйхенгрюна в год пятидесятой годовщины его маркетинга компанией Bayer.

Хотя здесь подробно описывается его заявление о совместном открытии аспирина, и несмотря на тот факт, что Хоффманн никогда не заявлял о его признании в печати, большинство авторитетов продолжали считать, что он был открыт только Гофманом из-за его синтеза 10 августа 1897 года. Тем не менее, внимательное изучение текста лабораторного отчета показывает, что это был не первый синтез аспирина в лабораториях Bayer. Также считалось, что Хоффманн открыл аспирин, потому что его имя было на букве U.S., но при этом не учитывается тот факт, что имя другого коллеги, Отто Бонхёффера, фигурировало в предыдущей заявке на патент Германии. Немаловажно, что вскоре после появления аспирина, в 1901 году, Эйхенгрюн стал директором фармацевтических и фотографических исследований, а Хоффманн стал директором по продажам. Эйхенгрюн был первым директором по фармацевтическим исследованиям в компании Bayer.

В своей новой роли Эйхенгрюн представил ряд продуктов, в том числе быстро действующий фотографический проявитель Edinol (гидрохлоридная соль 3-аминосалицилового спирта), автоматический дезинфицирующий агент Autan (комплекс гидроксида бария и полимеризованного формальдегида) и Cellit.Последнее стало результатом работы с Теодором Беккером по поиску замены легковоспламеняющейся пленке из нитрата целлюлозы, которая используется в быстро развивающейся кинематографической индустрии. Процесс, который они разработали в 1901 году для прямого ацетилирования целлюлозы при низкой температуре, чтобы предотвратить ее разложение, также позволил контролировать степень ацетилирования, тем самым избегая полного превращения в ее триацетат. Это позволило Эйхенгрюну и Беккеру в 1904 году представить надежный синтез целлита, стабильного, не хрупкого полимера ацетата целлюлозы, который можно было растворить в ацетоне для дальнейшей обработки.Затем Cellit использовался для производства негорючей кинематографической пленки, которую Eastman Kodak и Pathé Fréres начали использовать в 1909 году.

Eichengrün также разработал процесс сухого прядения, при котором Cellit распыляли в нагретую камеру во время производства ацетатного вискозного волокна. Это было лицензировано производителю текстиля Kunstseidenfabrik Jülich, который использовал его для начала производства искусственного шелка в 1907 году. Проблемы с нанесением красителей на новую ткань привели к тому, что от нее отказались до 1920-х годов.

Научно-исследовательская лаборатория и завод . Эйхенгрюн покинул Bayer в 1908 году и основал в Берлине собственную исследовательскую лабораторию по производству материалов на основе ацетата целлюлозы. В течение года или двух он разработал два новых продукта. Первым был Cellon, огнестойкий пластик, который заменил целлулоид. Во время Первой мировой войны он пользовался большим спросом на производство очков для летчиков, лобовых стекол и противогазов. Второй продукт представлял собой огнестойкий заменитель ацетата целлюлозы для смазки на основе каучука, нанесенной на ткань крыльев самолета для придания им водонепроницаемости.Это также использовалось в дирижаблях Zeppelin для дополнительного предотвращения утечки газа. Эти новые продукты производились по лицензии другими компаниями, но в 1915 году Эйхенгрюн основал свой собственный завод в Берлине, который в 1919 году был переименован в Cellon-Werke Dr. Arthur Eichengrün с почти семидесятью рабочими. Это был год, когда он впервые применил литье под давлением с использованием ацетата целлюлозы для формирования пластика, который первоначально был назван Lonarit. С тех пор литье под давлением используется во всем мире при производстве современных пластиков.

Компания Cellon-Werke процветала, но в 1933 году Эйхенгрюну пришлось продать часть своей доли в компании немцам арийского происхождения. В 1938 году нацисты вынудили его полностью уйти из компании, и в результате он продал свою фирму Chemische Fabrik Dr. Joachim Wiernik & Co. в Берлине-Вайдманншлюст. Благодаря своей репутации и влиятельным контактам, Эйхенгрюн оставался на свободе и продолжал свои исследования дома до тех пор, пока в 1943 году он не был заключен в тюрьму на четыре месяца за то, что не включил статутный «Израиль» как часть своего имени в письмо к чиновнику Рейха.В мае 1944 года он был депортирован в концлагерь Теризенштадт до его освобождения Красной Армией. Он вернулся в Берлин после войны, чтобы продолжить свою научную деятельность в частном порядке.

Айхенгрюн получил почетные докторские степени технических университетов Ганновера (1929) и Берлина (1947). В 1948 году он переехал в Бад-Виззее в Баварии, где умер 23 декабря 1949 года.

БИБЛИОГРАФИЯ

РАБОТЫ АЙХЕНГРЮНА

«Pharmazeutisch wissenschaftliche Abteilung.”В издании Geschichte und Entwicklung der Farbenfabriken vormals Friedrich Bayer & Co ., Vol. 2. «Böttinger Schrift», 409–416. Эльберфельд, Германия: Farbenfabriken, 1918.

«Photographische und technische Abteilung». В издании Geschichte und Entwicklung der Farbenfabriken vormals Friedrich Bayer & Co ., Vol. 2. «Böttinger Schrift», 457–462. Эльберфельд, Германия: Farbenfabriken, 1918.

«Ацетилцеллюлозен (целлюлозаацетат)». В № Enzyklopädie der technischen Chemie , отредактированный Фрицем Ульманном., 2-е изд., Т. 1. Берлин: Urban & Schwarzenberg, 1928.

«Cellit (I.G.)». В № Enzyklopädie der technischen Chemie , под редакцией Фрица Ульманна, 2-е изд., Vol. 3. Берлин: Urban & Schwarzenberg, 1929.

«Cellon-Lacke». В № Enzyklopädie der technischen Chemie , под редакцией Фрица Ульманна, 2-е изд., Vol. 3. Берлин: Urban & Schwarzenberg, 1929

«50 лет аспирина». Die Pharmazie 4 (1949): 582–584.

ДРУГИЕ ИСТОЧНИКИ

Bodenbender, H.Г. «А. Eichengrün zum 80. Geburtstag ». Angewandte Chemie 60 (1948): A111 – A112. О вкладе Эйхенгрюна в индустрию пластмасс, написанном по случаю его восьмидесятилетия.

Снейдер, Вальтер. «Открытие аспирина: переоценка». Британский медицинский журнал 321 (2000): 1591–1594.

Ваупель, Элизабет. «Артур Эйхенгрюн — дань уважения забытому химику, предпринимателю и немецкому еврею». Angewandte Chemie International Edition 44 (2005): 3344–3355.

———. «Cellit-Lacke und Cellon-Fenster: Die Kunstoffe des Chemikers Arthur Eichengrün und ihre Bedeutung für den Zeppelinbau». В Wissenschaftliches Jahrbuch 2006 , под редакцией Zeppelin Museum Friedrichshafen. Фридрихсхафен, Германия: Verlag Robert Gessler, 2006. О вкладе Эйхенгрюна в промышленность пластмасс и авиастроение.

Виммер, Вольфганг. Wir haben fast immer была Neues: Gesundheitswesen und Innovationen der Pharma-Industrie в Германии, 1880–1935 .Берлин: Duncker & Humblot, 1994. Обзор немецкой фармацевтической промышленности.

Walter Sneader

Журналы, авторы, подписчики, издатели, оповещение